SN_T 2799-2011进出口蜂王浆中磺胺类药物残留量测定方法 放射受体分析法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2799—2011进出口蜂王浆中磺胺类药物残留量测定方法方放射受体分析法Determination of sulfonamides residues in royal jelly for import andexport-Radio-receptor assay method2011-07-01实施2011-02-25 发布06AY中华人民共和国30:发布国家质量监督检验检疫总局4 SN/T 2799-2011言前本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局。本标准主要起草人：张晓峰、陈笑梅、施伟良、朱振江、帅江兵。 SN/T 2799--2011进出口蜂王浆中磺胺类药物残留量测定方法‧放射受体分析法1 范围本标准规定了蜂王浆磺胺类药物残留的放射受体分析（CharmⅡ）方法。本标准适用于蜂王浆中磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺对二甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺喹曬啉、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺异唑、磺胺二甲基异唑、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺苯吡唑和磺胺甲噻二唑等磺胺类药物残留总量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要放射受体分析(CharmI)方法的基础是药物功能团与微生物受体位点的结合反应，这些位点与某一类药物的共有功能团相关。应用受体的这种特异性可以实现对某一类药物的多残留分析。本方法中，样品中残留的磺胺类药物经提取、稀释后与[H标记的药物共同竞争结合特异的受体位点。在一定温度下反应后，离心分离，清除未结合的磺胺类药物，最后加人闪烁液，测定［3H衰变发出的β粒子放射性量值，计数cpm（count per minute），测得的cpm 值与样品中磺胺类药物残留量成反比。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1磺胺类检测试剂盒1。4.1.1 组织阴性对照浓缩干粉:组织阴性对照浓缩干粉贮存于 2℃～6℃。4.1.2MSU多抗标准品浓缩干粉：浓缩干粉贮存于2℃～6℃。4.1.3组织萃取缓冲溶液(MSU萃取缓冲溶液)干粉:贮存于 2℃～6℃。4.1.4M2缓冲溶液干粉:用于调节pH 值,贮存于 2℃～6℃。4.1.5磺胺类受体药片：白色，一15℃以下的条件保存。4.1.6磺胺类氛标记药片：粉红色，一15℃以下的条件保存。4.2组织阴性对照溶液：使用时取组织阴性对照浓缩干粉（4.1.1)按试剂盒说明书配制成阴性对照溶液。配制好的溶液可在2℃～6℃冰箱或冰浴中保存48 h。如长时间不用，可将溶液保存于一15℃以下的冰箱中，使用时将其解冻。再解冻的溶液在2℃～6℃温度下可保存24 h。1）给出该信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对某一产品的认可。如果其他产品具有相同的效果，需经实验评估后使用这些等效产品。1 SN/T 2799—20114.3MSU多抗标准溶液：使用时取浓缩干粉（4.1.2)按试剂盒说明书配制成多抗生素标准溶液。溶液的保存方法同 4.2。多抗标准品中含磺胺二甲嘧啶1000 ng/mL。4.4组织萃取缓冲溶液(MSU萃取缓冲溶液）：使用时取浓缩干粉（4.1.3)按试剂盒说明书配制成组织萃取缓冲液。可在2℃～6℃下保存2个月。4.5M2缓冲溶液：使用时取浓缩干粉(4.1.4)按试剂盒说明书配制成 M2缓冲液。可在2℃～6℃下保存2个月。4.6 OptifluorR 闪烁液。4.7阴性对照液:取 2 mL组织阴性对照溶液（4.2),加至 6 mL组织萃取缓冲溶液(4.4)中制成阴性对照液，在室温下混匀，该对照液可在室温下保持6 h 以上。此溶液用于分析仪器和试剂的性能监测。4.8阳性对照液:取0.3mL多抗生素标准溶液（4.3）,加至 15 mL组织阴性对照溶液中（4.2）,混匀;然后从中取2mL混合溶液加人到6mIMSU萃取缓冲溶液(4.4）中制成阳性对照液（磺胺二甲嘧啶浓度1.25ng/mL）；在室温下混合均匀。该对照液可在室温下保持6 h以上。此溶液用于分析仪器和试剂的性能监测。4.91mol/L盐酸：取 83mL分析纯浓盐酸加蒸馏水定容至1000mL4.1030%氢氧化钠溶液：称取30g氢氧化钠溶于水中，定容至100mL。X4.11甲醇:分析纯。4.12 pH试纸:范围 5～10。4.13C1:固相萃取柱:3 mL、60 mg。4.14空白基样：选取确认不含有磺胺类药物的蜂主浆,作为空白基样，用于测定当