SN 1193-2003基因检验实验室技术要求.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1193—2003基因检验实验室技术要求General requirements for the laboratories forgene detection and identification2003-03-17发布2003-09-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标基因检验实验室技术要求SN/T 1193--2003*中国标推出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16　印张1/2　字数10千字2003年6月第一版反　2003年6月第一次印刷印数 1 - 2 000网址 版权专有　侵权必究举报电话：（010SN/T 1193—2003前言本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：国家质量监督检验检疫总局动植物检疫实验所、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中华人民共和国广州出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。本标推主要起草人：朱水芳、陈红运、黄文胜、罩文、章桂明、曹际娟。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 SN/T 1193-2003基因检验实验室技术要求1范围本标准规定了转基因产品检测实验室总体要求、质量控制和质量保证。本标准适用于转基因产品检测实验室的建设和质量控制。2术语、定义和缩略语下列术语、定义和缩略语适用于本标准。12.1转基因产品 genetic ally modified organisms,GMOs;biotechnology modified products又叫生物技术产品。指用基因工程技术或者其他现代生物技术改变基因组构成的动物、植物、微生物及其产品。2.2聚合酶链式反应polymerase chain reaction聚合酶链式反应,简称 PCR。用一对寡核苷酸引物、四种脱氧核糖核苷酸(dNTPs），在合适的温度、离子条件及耐热DNA聚合酶催化下，在体外人工合成特异的模板DNA片段的过程。2.3实时荧光 PCR real-time fluorescent PCR,kinetic PCR,homogeneous PCR在传统的PCR反应体系中，加入了扩增模板特异性的荧光标记杂交探针，同时在常规的PCR仪上增加了荧光信号检测系统，使得PCR扩增产物的特异性及数量检测与PCR扩增同步进行。实时荧光PCR探针有多种，常用的有分子信标（molecular beacon）、Taqman探针和杂交双探针等。2. 4dUTP-DNA 糖基化酶 UNG,Uracil-DNA glycosylase一种特殊的DNA水解酶,它只水解掺有dUTP的DNA。此酶防污染的条件是：在 PCR扩增过程中用 dUTP取代 dTTP;在 PCR开始前用UNG酶处理 PCR扩增反应液;在碱性条件下高温(95℃)断裂 DNA。2.5缩略语2.5.1 PCR：polymerase chain reaction,聚合酶链式反应简称 PCR。2.5.2 DNA:deoxyribonucleic acid,脱氧核糖核酸。2.5.3 dNTP:deoxyribonucleoside triphosphate,脱氧核苷酸三磷酸。2.5.4 UNG:uracil-DNA glycosylase,尿嘧啶 DNA-糖基化酶。2.5.5 dATPdeoxyadenosine triphosphate,脱氧腺苷三磷酸。2.5.6 dTTP;deoxythymidine triphosphate,脱氧胸苷三磷酸。2.5.7 dUTP;deoxyuridine triphosphate,脱氧尿苷三磷酸。2.5.8 bp: base pair,碱基对。 SN/T 1193--20033实验室总体要求3.1基因检验实验室区域设置原则转基因产品检测实验室分为五个隔开的工作区域：试剂贮存和准备区、样品粉碎区、样品制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。如果使用荧光PCR仪，扩增区和扩增产物分析区可以合并。转基因产品检测实验室五个隔开的工作区域中每一区域都须有专用的仪器设备。工作区域及各区域所用的仪器设备必须有明确的标记，避免不同工作区域内的设备、物品混用。各区域实验台表面应可耐受次氯酸钠、双氧水等化学物质及紫外线的消毒清洁作用。3.1.1试剂贮存和准备区本区的功能为：贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混舍液的制备。贮存试剂和用于样品制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过产物分析区。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。当贮存试剂溶液经检查可用后，应将其分装贮存