SN_T 0496-2013出口粮谷中杀草强残留量检验方法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0496-2013代替SN0496—1995出口粮谷中杀草强残留量检验方法Method for the determination of amitrole residues in cereal for export2013-08-30 发布2014-03-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0496-2013前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准代替了SN0496-1995《出口粮谷中杀草强残留量检验方法》。本标准与SN0496--1995相比，主要技术性变化如下：修订了标准第一法和第二法的定量限。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局。本标准主要起草人：李金强、李晓玉、曹鹏、陈冰、耿金培、尹大路。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN 0496—1995。1 SN/T 0496—2013出口粮谷中杀草强残留量检验方法1 范围本标准规定了粮谷中杀草强残留量检验的液相色谱定量检测和液相色谱串联质谱定性、定量检测方法。本标准适用于大米、大麦、玉米、小麦中杀草强残留量的检测。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3第一法高效液相色谱法(HPLC法)3.1原理样品中的杀草强经二氯甲烷、1%冰乙酸混合溶液提取~混合阳离子交换柱净化浓缩后，经荧光胺衍生，以乙腈和磷酸缓冲液为流动相，用高效液相色谱荧光检测器测定，外标法定量。3.2试剂和材料除另有规定外，试剂均为绎确证的分析纯，水应符合GBXT.6682)的规定。3.2.1 乙腈:色谱纯。3.2.2 二氯甲烷:色谱纯。3.2.3丙酮：色谱纯。3.2.4正已烷。3.2.5 冰乙酸。3.2.6乙酸缓冲液：在 800 mL 005mol/L的乙酸溶液中加人 0.05 mol/L 的乙酸钠溶液至1 000 mL.3.2.7磷酸盐缓冲液:在0.05mol/L磷酸钠溶液中加人10%的磷酸调节pH为3.0。3.2.8碱性甲醇：氨水甲醇(5十95,体积比）。3.2.9PCX混合阳离子交换柱。3.2.10荧光胺：纯度大于98%。3.2.11杀草强标准品：纯度大于 97%。3.2.12标准储备液：称取杀草强标准品10.0mg，用甲醇配成0.1mg/mL的标准储备液。3.2.13标准工作液：根据需要取适当体积的标准储备液，用流动相配制成标准工作液，该工作液现用现配。3.3仪器设备3.3.1高效液相色谱仪：配荧光检测器（FLD)。1 SN/T 0496--20133.3.2旋涡混合器。3.3.3超声波清洗器（用于流动相脱气）。3.3.4 离心机。3.3.5旋转蒸发仪。3.3.6氮气吹干浓缩装置。3.3.7 离心管:50 mL。3.3.8样品粉碎机。3.4试样的制备和保存取有代表性的样品约200g，均分成两份作为试样，分别装在洁净的容器中，密封并做好标识，一般试样常温下保存，需要冷冻的试样于一18℃以下冷冻保存。3.5测定步骤3.5.1提取粮谷样品经粉碎过420μm标准筛，准确称取其中10.0g样品，加人10mL二氯甲烷，20mL冰乙酸水溶液（1%）放置20min，均质后5000r/min离心5min，过滤后取6mL滤液（相当于2.0g样品）净化。3.5.2净化 PCX 混合阳离子交换柱的活化先用3mL甲醇洗涤 PCX离子交换柱，然后再用3mL水洗涤后备用。样品净化将6mL提取液过已活化的PCX混合阳离子交换柱，分别用3mL甲醇和3mL水洗涤交换柱，弃去流出液，然后用4mL碱性甲醇洗脱交换柱，收集洗脱液，准确移取2mL洗脱液，45℃以下氮气吹干，用0.9mL乙酸缓冲液（3.2.6)溶解残渣。此溶液中加人100μL0.25%的荧光胺丙酮溶液，充分震荡混匀后放置1 h，过0.45 μm滤膜后用于仪器测定。3.5.3测定色谱条件色谱条件如下：a）色谱柱:BDS-C18 或 RP-18 ODS 反相柱 150 mmX4.6 mm(内径),5 μm 或相当者;b）柱温:40 ℃；c）流动相：磷酸盐缓冲液（3.2.7）十乙腈（70+30，体积比）；d）流动相流速:1.0 mL/min;e）检测波长：激发波长380nm；发射波长484nm；f）进样量:20 μL。标准曲线的绘制用流动相将杀草强标准储备液逐级稀释，得到浓度为0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L、1.0mg/L的标准工作液，浓度由低到高进样检测，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线。在上述色谱条2 SN/T 0496--2