新型隐球菌性颅内感染的临床特点及脑脊液隐球菌抗原胶乳凝集系统检测的临床应用.docxVIP

新型隐球菌性颅内感染的临床特点及脑脊液隐球菌抗原胶乳凝集系统检测的临床应用 随着免疫抑制剂的广泛应用和hiv感染病例的增加，新型隐窝性颅内感染的病例逐渐增多。新型隐球菌颅内感染是由新型隐球菌感染脑膜和脑实质所致的中枢神经系统的亚急性或慢性炎性疾病。该病多发生于机体免疫力低下、应用免疫抑制剂、应用抗生素导致菌群失调等情况。由于新型隐球菌性脑膜炎没有特异性的表现,往往导致误诊误治。因此本研究对本院78例新型隐球菌颅内感染患者的临床特点及其抗原检测的临床应用进行总结。 1 数据和方法 1.1 病例的来源 2002年1月～2007年5月在华中科技大学附属同济医院住院期间被确诊为隐球菌性脑膜炎或隐球菌性脑炎的78例患者。 1.2 本研究 新型隐球菌颅内感染的发病规律、临床表现、脑脊液常规、生化、病原学检查、血清细胞免疫学检查及影像学检查。 1.3 学习方法 回顾性临床研究,采用临床病例分析统计方法。对脑脊液进行常规,生化和抗原检测。计数资料以百分比(%)表示。 1.4 抗癫痫试验方法 本研究的隐球菌抗原胶乳凝集系统(CALAS)试剂盒和方法标准均由北京九强公司提供。 1.4.1 心密封制备 无菌操作下收集的标本在相对离心力为1000 r/min条件下离心15 min;吸取脑脊液放入消毒容器中,密封:立即作试验或-20 ℃冷冻保存备用,或者加消毒水以最终浓度为0.01%储存。每次试验前把脑脊液放入沸水浴中5 min,试验前冷却3～4 min。 1.4.2 标记圈内添加单一质控试剂,添加阴性质控胶乳 取出足够做当天质控和患者标本的测试卡;在测试卡上用标记笔标注质控和患者标本的位置;垂直拿瓶,在画好的两个标记圈内各滴一滴阳性质控试剂;在另外两个标记圈内分别滴25 μl抗体质控和25 μl阴性质控;同一患者标本在两个指定的标记圈内各滴25 μl;垂直拿瓶,在标记圈内各滴一滴检测胶乳;用相同的方式在同一标本另一标记圈内加一滴质控胶乳;充分混合标记圈里的内容物;用手顺时针划圆弧样轻轻晃动测试卡约5 min,防止溢出标记圈外;立即读数,从阴性到4+评价反应强度。 1.4.3 乳状悬液的凝块 阴性(-):未见凝块的均匀悬浮液。阳性分1+:乳状悬液中有细小凝块;2+:轻微浑浊悬液中有小而分明的凝块;3+:澄清的悬液中有大小不等的凝块;4+:非常澄清的悬液中有大块凝块。 1.4.4 反应效价与评论员的确定 (1)阴性:患者标本与检测胶乳的反应为阴性或1+,则报告为阴性。反应为1+则表明可能有隐球菌感染,如果患者症状提示有隐球菌感染,一定要做标本培养;(2)阳性:患者标本用检测胶乳和质控胶乳滴定,与检测胶乳的反应效价表现为2+甚至更高,则用最高稀释度来表明这个反应的效价。当脑脊液凝集效价为1∶4或者低于1∶4时,推断中枢神经系统感染新型隐球菌,应跟踪检查并做出培养;患者脑脊液效价为1∶8或者更高时,强烈提示感染新型隐球菌;(3)阳性与非特异性干扰:如果标本与检测胶乳的效价浓度至少高于因非特异性干扰所致效价浓度的4倍,应报告为有非特异性干扰的阳性,并说明标本效价相对于检测胶乳和质控胶乳;(4)因非特异性干扰而至实验无效:如果标本与检测胶乳的效价没有高出质控胶乳的4倍,则是因为非特异性干扰而至实验无效。 2 结果 2.1 一般数据 2.1.1 性别 男46例,女32例,年龄21～65岁,平均年龄32岁。 2.1.2 住院期间的病史 3 d至3月,平均31 d。 2.1.3 接触史 有鸽子接触史者6例,鸡或家禽接触史者20例。 2.1.4 合并疾病类型 15例(19.2%)患者有基础疾病或合并疾病,包括结核5例,糖尿病10例,血吸虫病2例,隐球菌性肺炎1例。既往无基础疾病者63例(80.8%)。 2.2 临床表现 2.2.1 感染的形式 69例(88.5%)为亚急性或慢性起病,9例(11.5%)为急性起病。 2.2.2 热伴发热并发症 单纯头痛起病者13例(16.7%),头痛伴发热起病者50例(64.1%),单纯发热起病者12例(15.4%),低热伴精神异常者3例(3.8%)。 2.2.3 表1显示了常见的症状 2.2.4 bruzenski征 (1)脑膜刺激征:颈抵抗71例(91.0%),Kernig征阳性68例(87.2%),Bruzinski征阳性57例(73.1%);(2)脑神经受损体征:65例(83.3%)出现脑神经受损,其中视神经损害(45例)最常见,表现为视力减退;动眼及外展神经麻痹共16例;听神经损害4例;(3)病理征:病理征阳性19例(24.4%)。 2.2.5 颅内压升高的症状 视乳头水肿41例(52.6%),后期视乳头萎缩1例(1.3%)。 2.2.6 临床定位 单纯累及脑膜者73例(93.6%),同时累及脑实质者4例(5.1%),单纯累及