SN_T 4817-2017进出口食用动物中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4817—2017进出口食用动物中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇残留量的测定液相色谱-质谱／质谱法Determination of clenbuterol , ractopamine, salbutamol residues in edibleanimal for import and export--HPLC-MS/MS method2017-07-21 发布2018-03-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局全房 SN/T 4817—2017前言本标准按照GB/T1.1~2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局。本标准主要起草人：张金玲、王凤美、梁广辉、郭礼强、孙军、颜显辉、张艺兵、赵丽青。 SN/T 4817—2017进出口食用动物中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了进出口食用动物中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于进出口猪、羊、牛等动物毛发和血浆中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇残留量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3　方法原理毛发样品经碱水解，有机溶剂提取浓缩，血浆样品用酶提取，经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱法测定，内标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1 乙醇。4.2氢氧化钠。4.3乙酸铵。4.4氯化钠。4.5叔丁醇。4.6 冰乙酸。4.7甲醇：色谱纯。4.8正已烷：色谱纯。4.9乙酸乙酯：色谱纯。4.10甲酸：色谱纯。4.11氨水:25%~~28% 。4.12浓盐酸:36%～38%。4.13萃取溶液：150mL叔丁醇（4.5)与350mL乙酸乙酯（4.9)混匀。 β-葡萄糖醛武酶/芳基硫酸酯酶溶液：含 β-葡萄糖醛武酶 111 000 unit/mL;芳基硫酸酯酶4.141 SN/T 4817-20171 079 units/mL.4.15乙酸铵缓冲溶液（2mol/L）：称取乙酸铵（4.3)77.0g，用水稀释并定容至500mL，混匀，加冰乙酸(4.6)调pH为 5.2。4.16固相萃取（SPE)柱：混合型阳离子交换固相萃取柱，基质为苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯高聚物，60 mg，3mL，或性能相当者。使用前依次用5 mL甲醇（4.7）、5 mL水对柱子进行活化。4.17洗脱溶液：50 mL乙酸乙酯（4.9）、45mL甲醇（4.7)与5mlL氨水（4.11)混匀。4.18定容液：移取1mL甲酸（4.10），用水稀释并定容至1000mL，混匀。4.19氮气：纯度≥99.99%。4.20标准品：盐酸克伦特罗（Clenbuterol hydrochloride），CAS编号：21898-19-1，纯度≥98.5%；盐酸莱克多巴胺（Ractopamine hydrochloride），CAS编号：90274-24-1，纯度≥98.0%；硫酸沙丁胺醇（Salbutamol sulfate),CAS编号:51022-70-9,纯度≥99.0%。4.21标准储备溶液（1000 mg/I）：分别准确称取盐酸克伦特罗，盐酸莱克多巴胺、硫酸沙丁胺醇标准品（折合成目标化合物10.0mg）（4.20），分别用适量甲醇溶解，并用甲醇定容至10mL。保存于一18℃冰箱,有效期12个月。4.22标准中间液（1000 ug/L）：用甲醇分别稀释盐酸克伦特罗、盐酸莱克多巴胺、硫酸沙丁胺醇标准储备溶液（4.21)至1000ug/L，4℃以下避光保存，有效期为6个月。4.23同位素内标物（100 mg/L）：克伦特罗内标溶液（Clenbuterol-D9），浓度为100 mg/L，溶剂为丙酮；盐酸莱克多巴胺内标物（Ractopaine-D3-HCl），纯度≥98.0%，准确称取盐酸莱克多巴胺内标物（折合成目标化合物10.0mg），用适量甲醇溶解，并用甲醇定容至100ml；沙丁胺醇内标溶液（SalbutamolD3),浓度为 100 mg/L,溶剂为丙酮。4.24同位素内标中间溶液（1.0mg/L）：用甲醇分别稀释克伦特罗-D9、莱克多巴胺-D3、沙丁胺醇-D3(4.23)至1.0 mg/L。4℃以下避光保存，有效期为6个月。4.25标准工作液（10 μg/L）：根据需要移取适量标准中间液、同位素内标中间液，用甲醇稀释，配制浓度均为10 μg/L的