独圣活血片中8种成分的含量测定及聚类分析、主成分分析.docxVIP

? ? 独圣活血片中8种成分的含量测定及聚类分析、主成分分析 ? ? 孙德国，梁 璇，马灵珍(.辽宁中医药大学附属医院药学部，沈阳 0032；2.亳州职业技术学院药学院，亳州 236800) 独圣活血片由三七、醋延胡索、当归、鸡血藤、大黄、香附(四炙)和甘草7味中药材制成，主治跌打损伤、瘀血肿胀以及气滞血瘀所致的痛经，现收载于《中国药典》2015年版一部[1]，质量标准和文献报道[2]仅对该制剂所含三七皂苷R1和人参皂苷Rg1进行了定量检测。现代研究表明，独圣活血片联合双氯芬酸钠可有效改善患者临床症状和机体血液流变学指标，促进肢体功能恢复[3]，对软组织损伤疗效显著[4]；其联合五子衍宗丸可增加月经量过少患者的月经量与持续月经周期，对肾虚血瘀型月经过少症具有良好的治疗效果[5]。中药及其制剂所含成分复杂，药材中主要成分受产地、采收季节以及炮制加工方法等多种因素的影响，单味药材所含成分不能全面反映中药及其制剂，尤其是中成药复方制剂的整体质量，多指标成分评价模式已逐步应用于其质量控制中，同时通过聚类分析和主成分分析等化学计量学分析方法，将多指标成分评价模式提供的数据信息进行充分整合，有利于揭示中药及其制剂复杂成分间隐藏的规律，避免综合评价时主观加权的弊端。独圣活血片方中三七散瘀止血、消肿定痛，醋延胡索活血、行气、止痛，共为君药；当归和鸡血藤活血补血、调经止痛，大黄逐瘀通经、泻下攻积，合为臣药；香附(四炙)理气宽中、调经止痛，为佐药；甘草缓急止痛、调和诸药，为使药。7味中药所含成分相互协同、互相制约，共奏活血消肿、理气止痛之功。为了确保产品质量和临床疗效的稳定性，本实验根据“君臣佐使”中医配伍理论，采用HPLC法对独圣活血片中君药醋延胡索主要活性成分延胡索乙素、紫堇碱和四氢小檗碱，臣药鸡血藤代表性成分儿茶素、表儿茶素和美迪紫檀素，佐药香附(四炙)主要活性成分香附烯酮和α-香附酮的含量进行同时测定，建立独圣活血片多指标成分质量控制模式，并采用SPSS 26.0统计软件对所测8种成分的含量进行聚类分析和主成分分析，有助于药品生产企业和监管部门不断完善该制剂的质量控制标准，为控制该制剂的整体质量提供参考。 1 仪器与试药 1.1仪器 Waters 2695型高效液相色谱仪(美国Waters公司)；Sartorius BP211D型电子天平(德国Sartorius公司)；KQ-250E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。 1.2试药 延胡索乙素(质量分数为99.8%，批号110726-201819)、儿茶素(质量分数为99.2%，批号110877-201604)、表儿茶素(质量分数为99.7%，批号110878-201703)和α-香附酮对照品(质量分数为99.4%，批号110748-202016)，均购于中国食品药品检定研究院；紫堇碱(质量分数为99.9%，批号PR和四氢小檗碱对照品(质量分数为98.8%，批号 PRF8050941)，购于成都普瑞法科技开发有限公司；美迪紫檀素(质量分数为100.0%，批和香附烯酮对照品(质量分数为95.5%，批，购于上海同田生物技术股份有限公司；乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯。独圣活血片(薄膜衣片，批号：1904003，1905004，1905005，1906006，1909009，1909010，2003001，编号分别为S1～S7；糖衣片，批号：1908012，1910014，1911018，编号分别为S8～S10)，均购于太极集团四川绵阳制药有限公司。 2 方法与结果 2.1溶液的制备 2.1.1混合对照品溶液 精密称取8种成分对照品各适量，用体积分数为70%的乙醇制成质量浓度分别为0.592，0.484，0.356，1.094，1.258，0.116，1.452，0.716 mg·mL-1的混合对照品储备液。精密吸取上述混合对照品储备液0.1，0.2，0.5，1.0，1.5，2.0 mL，分别用体积分数为70%的乙醇稀释至20 mL，制成系列质量浓度的线性混合对照品溶液Ⅰ～Ⅵ；取线性混合对照品溶液Ⅳ作为混合对照品溶液(8种成分质量浓度分别为29.6，24.2，17.8，54.7，62.9，5.8，72.6，35.8 μg·mL-1)。 2.3线性关系考察 精密吸取2.1.1项下制备的线性混合对照品溶液Ⅰ～Ⅵ各10 μL，按照2.2项下色谱条件进样测定独圣活血片中8种成分的峰面积，分别以8种成分质量浓度为横坐标(x)、峰面积为纵坐标(y)进行线性回归，得8种成分的回归方程及线性范围，见表1。 2.1.3阴性样品溶液 按照独圣活血片质量标准[1]项下处方工艺，分别制备缺香附(四炙)、鸡血藤和醋延胡索的阴性样品，再按照2.1.2