SN_T 1035-2011进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1035—2011代替 SN/T 1035-2002进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法Determination of Penicillium chrysogenum ,Aspergillus and related toxin in foodstuff for import and export2011-02-25 发布2011-07-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局(D)紫码照店 SN/T 1035--2011前#言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准代替SN/T1035-2002《进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法》。本标准与 SN/T1035一2002相比，主要技术变化如下：将中文名称改为《进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法》。-增加了附录 B培养基与试剂。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中华人民共和国齐齐哈尔出人境检验检疫局。本标准主要起草人：刘伟、张宏伟、马旭、侯丽萍、张海英、蔡国瑞、贺艳、庞春贤、曲鹏。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T 1035—2002。 SN/T 1035—2011进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法1 ·范围本标准规定了食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检验方法。本标准适用于食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检验。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T4789.16食品卫生微生物学检验常见产毒霉菌的鉴定SN/T1538（所有部分）培养基制备指南3试样的制备和保存3.1试样制备从原始样品中取出部分有代表性的样品，将可食部分用绞碎机绞碎，充分混匀。用四分法缩分出不少于500g，作为试样。装人清洁容器伪，加封并表硼标记。3.2试样保存将试样于一18℃以下冷冻保存，在抽样及制样的操作过程中，应防止样品愛到污染或发生残留物含量的变化。4　测定方法4.1方法提要以无菌操作称取有代表性的样品，然后进行微生物培养，按照GB/T4789.16中检索表进行镜检、鉴定,对可疑的真菌进行产毒培养，用标准菌株检测培养液是否存在毒素，从而得到定性的结果。检验流程参见附录 A。4.2材料和设备4.2.1试管：直径17 mm，长170 mm。4.2.2 吸管:1.0 mL和10 mL。4.2.3 离心机:3000g。4.2.4振荡器。4.2.5培养Ⅲ:内径90 mm。4.2.6载玻片和盖玻片。4.2.7U形玻璃棒。 SN/T 1035-20114.2.8定性滤纸。4.2.9牛津杯:外径8.0 mm±0.1mm,内径6.0 mm±0.1 mm,高10.0mm±0.1 mm。4.2. 10毛细管。4.2.11游标卡尺。4.2. 12显微镜。4. 2. 13标准菌株：巨大芽孢杆菌（Bacillus megatherium）。4.2.14标准产毒真菌菌株：纯绿青霉（Penicillium viridicatum）、桔青霉（Penicillium citrinum）、寄生曲霉（Asperigillus Parasiticus）杂色曲霉（Asperigillus versicolor）。4.3培养基和试剂除另有规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。4.3.1 肉汤培养基:参见 B.2。4.3.2孟加拉红培养基：参见B.3。4.3.3察氏培养基:参见 B.4。4.3.4产毒培养基：参见 B.5。4.3.5营养琼脂培养基：参见 B.6。4.3.620%甘油水溶液。4.4细菌菌种培养和芽孢悬浮液的制备4.4.1菌种培养将装有菌种的安瓶上部消毒后敲碎，加入少量肉汤培养基，使其溶解并移至肉汤管中混匀，置于37℃±1℃培养6h,再转接至另一肉汤管中37℃±1℃培养18h。将培养物接种于营养琼脂斜面，37℃士1℃培养1周，镜检，芽孢数达85%以上时便可制备芽孢混悬液。4.4.2芽孢混悬液的制备用适量灭菌生理盐水冲洗菌苔，然后将该菌液移至离心管中，充分摇匀后于3000g离心30min弃去上清液，再加人同样量的灭菌生理盐水，摇匀后65℃水浴中加热30min，然后于1000g离心5min，取上清液并转人灭菌试管中，即为芽孢悬浮液，稀释并测定浓度，置于冰箱中 4℃保存。4.5检验步骤4.5.1接种培养样品制备精确称取25g（或吸取25mL)有代表性的样品，放人装有225mL无菌水的三角瓶或广口瓶中，振荡30 min，然后10倍递增稀释至所需要的浓度。分离培养用灭菌吸管吸取1mL样品液放人平皿内，加人15