生化第二章核酸的结构和功能.pptVIP

一、核酸的一般理化性质 核酸具有酸性； DNA分子粘度大；RNA 分子粘度小 能吸收紫外光，最大吸收峰为260nm。 可用于核酸的定性和定量测定 当前第94页\共有137页\编于星期四\4点 各种碱基的紫外吸收光谱（pH 7.0） 当前第95页\共有137页\编于星期四\4点 DNA或RNA的定量 A260 = 1.0 相当于 50μg/ml 双链DNA(dsDNA) 40μg/ml 单链DNA (ssDNA or RNA) 20μg/ml 寡核苷酸 确定样品中核酸的纯度 纯 DNA: A260/A280 = 1.8 纯 RNA: A260/A280 = 2.0 紫外吸收的应用 当前第96页\共有137页\编于星期四\4点 二、DNA的变性(denaturation) 定义：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、 酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。 变性后其它理化性质变化： 增色效应 粘度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 当前第97页\共有137页\编于星期四\4点 DNA变性的本质是双链间氢键的断裂 部分解链 双链DNA 当前第98页\共有137页\编于星期四\4点 一 、信使RNA(messenger RNA) 信使RNA(messenger RNA, mRNA)是细胞内合成蛋白质的模板。 生物体内mRNA的丰度最小（2-5%）、种类最多、大小也各不相同、寿命最短。 mRNA的初级产物为不均一核RNA (hnRNA)，含有内含子(intron)和外显子(exon)。 hnRNA经过剪切后成为成熟的mRNA。 当前第62页\共有137页\编于星期四\4点 当前第63页\共有137页\编于星期四\4点 当前第64页\共有137页\编于星期四\4点 * mRNA结构特点 1. 大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷，同时第一个核苷酸的C′2的羟基也是甲基化，形成帽子结构：m7GpppN-。 2. 大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸(polyA)结构，称为多聚A尾。 当前第65页\共有137页\编于星期四\4点 帽子结构:m7GpppNm mRNA的帽结构可以与帽结合蛋白(cap binding protein，CBP)结合。 使mRNA免遭核酸酶的攻击 与帽结合蛋白复合体结合，参与mRNA和核糖体的结合，启动蛋白质的生物合成 当前第66页\共有137页\编于星期四\4点 5? pppGp… 5? GpppGp… pppG PPi 鸟苷酸转移酶 5? m7GpppGp… 甲基转移酶 SAM 帽子结构的生成 5? ppGp… 磷酸酶 Pi 　 5?, 5?-三磷酸结构 当前第67页\共有137页\编于星期四\4点 加尾(adding tail) 尾部修饰是和转录终止同时进行的过程。 poly A的有无与长短，是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身稳定性的因素。 一般真核生物在胞浆内出现的mRNA，其poly A长度为100至200个核苷酸之间，也有少数例外。 mRNA的多聚A尾在细胞内与poly(A)结合蛋白（poly(A)-binding protein，PABP）结合 当前第68页\共有137页\编于星期四\4点 编码区：mRNA分子中每三个相邻的核苷酸组成一组，在蛋白质翻译合成时代表一个特定的氨基酸，这种核苷酸三联体称为遗传密码（coden） 位于起始密码子和终止密码子之间的核苷酸序列称为开放阅读框(open reading frame, ORF)，决定了多肽链的氨基酸序列 。 功能:为蛋白质的合成提供模板 当前第69页\共有137页\编于星期四\4点 原核生物基因表达的特异性 基因表达在真核细胞和原核细胞中表现出不同的时空特性 当前第70页\共有137页\编于星期四\4点 真核生物基因表达的特异性 当前第71页\共有137页\编于星期四\4点 二、转运RNA(transfer RNA) 转运RNA(transfer RNA, tRNA)在蛋白质合成过程中作为各种氨基酸的载体, 将氨基酸转呈给mRNA。 由74～95核苷酸组成； 占细胞总RNA的15%； 具有很好的稳定性。 当前第72页\共有137页\编于星期四\4点 N,N二甲基鸟嘌呤 N6-异戊烯腺嘌呤 双氢尿嘧啶 4-巯尿嘧啶 稀有碱基（rare base）是指除A、G、C、U外的一些碱基 1. tRNA中含有多种稀有碱基 tRNA分子中的稀有碱基均是转录后修饰而成的 当前第73页\共有137页\编于星期四\4