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悬钩子属植物中茶多酚的提取与含量测定 悬钩子属植物是蔷薇科多年生落叶灌木，茎直立或生长，皮刺。叶子是交替的，叶子是倾斜的，边缘是齿状的。花通常是双壳状的，白色或浅红，像花序，花瓣5，有时不足，许多雄蕊。大多数皮肤都很离茎，生长在一个突出的花头上。这种水果的融合是混合水果。该属植物在山区与丘陵地区广泛分布,或成片生长或单独丛生,从春到冬花果不断,国外已将其作为第三代水果上市,我国有190余种。 悬钩子果实属浆果类,果实味甜酸,可直接食用,也可制酱、加工饮料、酿酒、熬糖、制醋。它富含氨基酸、矿质元素、有机酸、VE、大量的SOD 和类SOD 生物活性物质,VC的含量比普通水果如梨、香蕉、柿子和桃略高,微量元素与普通水果无显著差别,有机酸总量和淀粉含量比普通水果高。悬钩子叶片含丰富的人体必需营养素和小分子抗氧化剂,具有营养和保健价值。这些小分子抗氧化剂除SOD之外,还有目前正在开发的天然食品抗氧化剂——茶多酚(Tea Polyphenols,TP)。茎皮叶均含多酚类化合物、纤维素。花是重要的蜜源植物,全株可入药和作为绿化观赏树种,等。 悬钩子属植物在我国27 个省和自治区均有分布,人们对该类植物的开发提出了许多建议,并进行了人工种植尝试,但是存在较大的种间和种内差异,地域气候环境对种的差异有影响。从抗氧化角度来看,有研究表明果类抗氧化活性强弱与果类所含酚类的种类与含量有关,且植物体中各种天然抗氧化成分有协同作用。限于实验条件,我们仅研究了地处皖南山区池州市的悬钩子属植物的食用价值与茶多酚含量,目的是综合利用悬钩子属植物,促进其全面开发,提高经济效益。 1 苏集水实现悬钩子属植物种类 池州市是我国第一个国家级生态经济示范区,位于安徽省西南部的长江南岸,地势南高北低,由九华山、牯牛降为主体构成南部山区骨架。山地以海拔500～1000m为主,丘陵多以海拔100～500m的地形组成;年均降水量1269.1 mm,年均温17.1℃,≥10 ℃积温5068.7℃,年平均太阳幅射总量为474.07kJ/cm2;无霜期233d,初霜日稍早,终霜日稍迟。由于气候和光热条件较好,地形复杂,气温、降水、幅射垂直变化明显,因而拥有众多的生物资源。目前在池州市共发现有悬钩子属植物10种,占皖南山区该属植物资源的1/2。其植物资源的分布与果实的风味见表1。 从表1可见,池州的10种悬钩子属植物主要是民间的传统应用,并未得到全面开发。目前文献报道该属从植物种质资源、提取拷胶与药用的角度开发较多,但关于全株综合开发研究较少,研究其中的天然食品添加剂TP的报道更少,为此我们研究了池州部分悬钩子植物中的TP含量。 2 初筛率tp和标准曲线ac分析 实验材料:悬钩子一部分采自池州市山区,一部分购自池州百牙药房,共得到8种悬钩子植物茎叶。 主要仪器与试剂:紫外可见分光光度计(北京普析TU-1901)、分析天平(北京sartorius)、循环水多用真空泵、低温干燥箱、索氏提取器,所有试剂均为AR,水均为二次水。TP标准品是经农业部茶叶监督检验测试中心检测(No的TP,TP含量88.9% 。 实验方法:悬钩子茎叶经粉碎并以水为溶剂浸润0.5 h, 索氏抽提后合并提取液, 以CH3COOC2H5萃取。萃取液用少量无水CaSO4与 MgSO4混合干燥剂干燥,减压蒸馏浓缩并低温干燥得粗成品供试。从悬钩子叶中提取的TP含量分析按文献进行。以悬钩子茎叶提取的TP含量作为考查指标, 系统考察了溶剂用量、提取时间和提取次数对提取效果的影响。选用L9(34) 正交表, 考察因素及水平见表2。称取上述TP标准试样0.0500g,加水溶解后定容50ml得100 mg·L-1的标准溶液。取1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml的上述标准溶液分别置于5个 50ml的容量瓶中,用水稀释至刻度。在波长263.0nm 下,分别测定上述各标准溶液的吸光度A,作A-C 曲线。A 对于C的一元线性回归方程为:A=-3.991+0.0174C ,相关系数为:r=0.9994。 3 结果与讨论 3.1 各因素最佳提取条件的确定 根据正交表L9(34)分9组试验,结果见表3。 从表3与表4分析得出,各因素中所起作用的主次顺序为 A、B、C。综上所述,从水平和测试项目分析可得最佳提取条件为A2B2C2。即用80ml的水提取2次, 每次回流提取30min ,用等体积的乙酸乙酯萃取。 3.2 不同ph值对tp含量的影响 在上述最佳条件下实验了不同pH对TP含量提取的影响,见图1。根据图1,我们选择pH在4左右进行提取TP。 3.3 根据滁州悬钩子tp的分析结果表5 4 资源特点及用量对生物资源利用的影响 目前悬钩子资源尚处于野生状态,品种选育研究力度不够,人工栽培面积少,产量低,后续