孟河医派苍术特色炮制品与其他炮制品中β-桉叶醇、苍术酮和苍术素含量差异的研究.docxVIP

? ? 孟河医派苍术特色炮制品与其他炮制品中β-桉叶醇、苍术酮和苍术素含量差异的研究 ? ? 曹 琰 刘产明 张 琪 朱月琴 黄 玮 （常州市中医医院，江苏常州 213003） 苍术始载于《神农本草经》，列为上品，称其“主风寒湿痹，死肌痉疸……作煎饵，久服，轻身延年不饥”，其生品、炮制品均在临床上应用广泛。传统认为苍术苦温燥烈，因此阴虚内热、气虚多汗者忌用。但经炮制后可缓和燥烈之性，降低辛烈温燥的不良反应。孟河医学为我国著名地域性医学流派之一，在临床上之所以有独到而确切的疗效，除了脉理精细，用药精当外，其独特的中药炮制技术也是重要原因[1]。其中苍术的炮制方法多样，所用辅料颇具特色。“泔浸麻油拌炒”“黑芝麻拌蒸”等制法在现有的炮制规范中未见有收载。本研究以苍术及其现代主要炮制品、孟河医学特色炮制品为研究对象，采用GC-MS分析苍术挥发油中主要成分β-桉叶醇、苍术酮和苍术素的含量，为苍术及其不同炮制品的质量评价、炮制机制的阐释提供科学依据。 1 材料 1.1 仪器 PerkinElmer Clarus气相色谱仪串联AXION-iQT质谱检测器（美国PerkinElmer公司）；NIST标准质谱图库（2011版，美国国家标准技术研究院）；WILEY标准质谱图库（美国John WileySons公司）；电子天平（上海梅特勒托利多仪器有限公司）；KH-500型超声波清洗仪器（昆山禾创声波仪器有限公司）。 1.2 药材与试剂 苍术药材购自苏州市天灵中药饮片有限公司（批号：170627），经南京中医药大学刘产明教授鉴定为菊科植物北苍术Atractylodes chinensis（DC.）Koidz.的干燥根茎。对照品苍术酮（批号：H4520005，纯度≥90%）、苍术素（批号：H4510010，纯度≥98%）购自上海安谱实验科技股份有限公司；β-桉叶醇（批号：BCBR5666V，纯度≥90%）购自Sigma公司；正己烷为分析纯，购自南京化学试剂有限公司。 2 方法 2.1 苍术不同炮制品的制备 2.1.1 麸炒苍术 取麸皮撒入热锅内，用中火加热，俟冒烟时，加入苍术片，拌炒至表面呈深黄色，取出，筛去焦麸皮，放凉。100kg苍术片，用麸皮10kg。 2.1.2 米泔水制苍术 取苍术片，用米泔水浸泡片刻，取出，用文火炒干。100kg苍术片，用米泔水20kg。 2.1.3 焦苍术 取苍术片，用中火炒至外表焦黄色，取出放凉。 2.1.4 泔浸麻油拌炒苍术 取苍术片，用米泔水浸一夜，取出，焙干。取焙后苍术片，加麻油拌透，置热锅中，用文火不断翻炒至焦黄色，取出，晒干。100kg苍术片，用麻油20kg。 2.1.5 黑芝麻拌蒸苍术 取苍术片，加黑芝麻，拌匀，置锅内，隔水加热，上气后蒸1h，停止加热，闷透，取出，晒干。100kg苍术片，用黑芝麻20kg。 2.2 色谱条件 Agilent HP-5MS石英毛细管色谱柱（0.25mm×30m，0.25μm）。载气：氦气；分流比20∶1，流速1mL/min；进样口温度200℃，检测口温度250℃，进样量1μL。程序升温：初始温度90℃保持2min，以15℃ /min升至130℃，保持1min；以3℃ /min升至180℃，保持1min；以5℃/min升至280℃，保持2min。 2.3 质谱条件 电子轰击离子源（EI），离子源温度230℃，电子能量70eV，气相色谱-质谱接口温度230℃，扫描范围m/z 40～400。对照品、供试品的总离子流图见图1。确定各目标化合物的保留时间和特征离子，再采用选择离子监测模式进行定量，选择监测离子m/z 149（β-桉叶醇），216（苍术酮），182（苍术素）。 图1 混合对照品（A）和苍术样品（B）的GC-MS图谱 2.4 对照品溶液的制备 精密称取β-桉叶醇、苍术酮和苍术素对照品9.10、15.30、41.55mg置于50mL容量瓶中，用正己烷溶解并定容至刻度，摇匀，分别得到浓度为0.182、0.306、0.831g/L的 混 合 对照品溶液。 2.5 供试品溶液的制备 将苍术及其不同炮制品粉碎过40目筛，精密称取苍术生品及各炮制品粉末0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入正己烷15mL，称重，超声处理（功率400W，频率40kHz）30min，取出放冷，再称重，以正己烷补足失重，摇匀，13000r/min离心10min，取上清液，以0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液[2]。 2.6 方法学考察 2.6.1 标准曲线的绘制 精密量取2.4项下混合对照品溶液0.25、0.50、1.00、2.50、5.00mL，分别置于10mL量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀，得到系列标准溶液。分别取1μL，按2.2项下色谱条件和2.3项下质谱条件进行GC-MS/SIM分析。