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- 2023-08-16 发布于广东
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全自动时间分辨荧光免疫分析仪auocaddelfi-1a235的体会
全时间荧光免疫分析仪(autodellfia235)是由美国perkinelmer公司生产的一个自动96孔微孔板的自动处理装置,集采样、孵育、清洁和检测于一体。本文就笔者操作auto DELFI-A1235的体会和常见故障及处理进行简单介绍。
1 测量标记物的荧光强度
时间分辨荧光免疫分析方法与传统标记方法的区别是其应用稀土离子作为标记物, 最常应用的是镧系元素中的铕 (Eu) 和钐 (Sm) 。在接受激发光照射后, 普通荧光物质的衰变时间仅为1~10 ns, 而稀土离子荧光寿命比其长100~1 000倍不等, 待样品中杂的荧光猝灭后, 再测量标记物的荧光强度, 可以消除自然本底荧光的干扰。此外, 测量时激发光是380 nm, 而发射光是620 nm, 发射光与激发光的Stock光谱位移大, 以上2种因素极大地提高了该方法检测信噪比, 使得该方法具有极高的检测灵敏度。TRFIA应用的是微孔板包被抗原或抗体作为固相载体, 结合了待测样本中的待测物质后, 再加以Eu标记的抗原或抗体, 经洗板后, 洗去游离的Eu标记物, 微孔板内形成了固相抗体 (抗原) -待测抗原 (抗体) -Eu标记抗体 (抗原) 复合物, 加入增强液后, 与上述复合物中的Eu形成新的螯合物, 经激发光照射后, 测量荧光强度, 样本中的物质的含量
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