DNA提取实验报告 前言.docVIP

前言 DNA作为生命体特有的遗传物质载体，携带生命个体生长与发育等必需的所有遗传信息，以纯化的DNA分子形式或者基因组文库的方式进行保存就意味着对种质资源的保存，是传统资源保存方式的重要补充。核酸分为DNA和RNA两大类。DNA主要存在于细胞核内，核内DNA占整个细胞DNA量的90％以上，核外DNA主要有线粒体DNA(或植物叶绿体DNA)和质粒DNA。RNA主要存在于细胞质中，其中微粒体中RNA约占细胞RNA总量50％，细胞液中RNA约占总量30％，其余便在核仁，线粒体及其他细胞器中。核酸是两性化合物，有一定等电点，能与金属结合成盐，又能与碱性物质结合形成复合物。在核酸大分子中，由于磷酸基的酸性比嘌呤、嘧啶基的碱性强，故其水溶液呈酸性。不论DNA或RNA都能溶于水，而不溶于乙醇等有机溶剂。在分子生物学研究方面，DNA提取是开展工作的前提，要进行PCR反应、DNA测序、Southern杂交及转基因克隆重组等都离不开高质量完整的DNA提取。因此，DNA提取纯化技术作为一项基础研究工作，具有理论和实践双重意义。 在传统的DNA提取方法中DNA和RNA在细胞中常与蛋白质结合存在。这种蛋白质．核酸复合物是细胞结构的组成之一．因此，细胞破碎后提取分离核酸，首先遇到的问题是如何把核蛋白与其他蛋白质分开，然后才进一步把核酸和蛋白质分离。故最早提取分离核酸方法是在以蛋白质提取分离原理为基础上进行的。由于分子生物学的发展，核酸制各技术突飞猛进，传统法提取核酸由于操作时间过长，核酸降解比较严重，即细胞破碎后，用提取缓冲液将DNA-蛋白质释放出来，多次苯酚、氯仿等有机溶剂抽提使蛋白质变性沉淀于有机相，而核酸保留在水相，达到分离核酸的目的，中间不用把核蛋白分离。本次实验就是通过氯仿/异戊醇法来进行DNA的提取。 从生物体中提取DNA已成为分子生物学实验室中的一项常规技术，也是进行分子生物学研究的基础。该技术的建立和优化将为生物种质保存、鉴定和评价奠定坚实的基础，为今后生物品种知识产权保护、基因文库构建、分子辅助育种和基因克隆重组、功能鉴定等的分子生物学下游实验提供技术支持． 离心洗涤离心 离心洗涤 离心 动植物材料 DNA溶液 干燥溶解有机沉淀上清液细胞裂解研磨 DNA溶液 干燥溶解 有机沉淀 上清液 细胞裂解 研磨