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- 2023-08-22 发布于上海
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AtLal基因对拟南芥根尖干细胞维持与分化的调控的中期报告
背景:
根尖干细胞是拟南芥根系统的基石,其维持与分化对植物生长发育至关重要。AtLal基因作为一个未知功能的转录因子,在先前的研究中被鉴定为根尖干细胞中高表达的基因。本实验旨在研究AtLal基因对根尖干细胞维持与分化的调控作用。
方法:
1. 构建AtLal基因敲除菌株
通过CRISPR-Cas9技术,设计sgRNA并构建AtLal基因敲除菌株,验证敲除效果。
2. 观察基因敲除对根尖干细胞数量的影响
使用荧光显微镜观察AtLal基因敲除菌株与野生型菌株的根尖细胞,并统计根尖干细胞数量。
3. 检测基因敲除对根尖中分化相关基因表达的影响
通过qPCR检测基因敲除对根尖中分化相关基因EXPANSIN、WUSCHEL、CLAVATA3和PINFORMED1表达的影响。
结果:
1. 构建了AtLal基因敲除菌株并验证了敲除效果。
2. AtLal基因敲除导致根尖干细胞数量显著减少。
3. AtLal基因敲除导致EXPANSIN、WUSCHEL和CLAVATA3表达的下调,且PINFORMED1表达不变。
结论:
AtLal基因对拟南芥根尖干细胞的维持与分化起到了正向调控作用,并参与了EXPANSIN、WUSCHEL和CLAVATA3的表达调控。
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