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一种蛋白质水解液水解度测定方法的建立 大豆苷是在脱水后由瓜氨酸中断引起的短醇链的混合物。由于它的良好耐酒性和特殊的生理活性，已得到广泛研究。 现在大豆多肽的生产工艺主要是利用各种不同性质的蛋白酶作用于大豆蛋白将其水解成不同链长的短肽。由于只有由3~6个氨基酸残基组成的短肽链才具有独特的功能特性,因此在生产中,反映原料蛋白被水解程度的指标水解度(DH,Degree of Hydrlysis)的及时测定和实时控制便成为保证产品质量的关键。水解度通常的定义为: 常用的蛋白水解液水解度的测定方法有三种,详见表1。 本实验室目前进行的微生物水解法产大豆多肽的研究中,需即时准确的测定微生物发酵液中大豆蛋白在不同时间的水解度以控制产品品质,优化发酵工艺。常用的三种测定方法由于各自的局限性均不能达到本研究的要求。因此,我们根据水解度的定义,借鉴间接测定法的原理,建立了一种新的水解度测定法。以不同时间的大豆蛋白发酵液为样品,用新建立的方法和TCA沉淀法测定其水解度,并对两者结果进行比较,以探讨新方法测定水解度的可行性。 1 材料和方法 1.1 改良大豆蛋白、氨基酸标准液及三酮试剂 豆粕粉 市购低温脱脂豆粕,经凯氏定氮测定其大豆蛋白含量为43.7%;发酵菌种实验室保藏菌种,此菌能在发酵过程中产蛋白酶水解大豆蛋白;茚三酮显色液改良的茚三酮试剂-乙二醇并补加正丁醇和丙酮的茚三酮溶液这种试剂灵敏度高且稳定