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rna核质动态分布与蛋白质翻译 1 impoin家族在真核细胞运 在真核细胞中，核心和骨髓之间进行着强烈的物质运输，其中大部分是由需要蛋白质支撑的主动运输的。核心和核心之间的边界是核膜，在核膜上分布着核面颗粒配合物（nureme）。这是通过蛋白质运输蛋白质和传达个人信息以运输“商品”的方式。在真核细胞中，负责核质运输的蛋白质有许多不同的种类，其中最重要的是imperinimplinimplin根据家族中的代表性蛋白质implin命名为（imp-蛋白质后缀i），包括将目标分子运输到核粒中的implin和离开内核的explin。目标分子与rangdtal.（ras蛋白，24ku）形成化合物，并通过核孔与家族成员分离。此前，在人类细胞中发现了20多名成员，负责运送蛋白素、糖苷元、蛋白质和其他重要分子，如蛋白素。通过这种精确的组织行为，implin家族成员不仅可以通过捕获细胞周期的蛋白质cyclinh、cycline、cdc2等，而且可以干预细胞周期的过程。implin结合微管单体蛋白质，抑制微管的多聚化，限制微管的融合和锤体的形成，阻止微管和针的形成，并确定薄细胞的周期。implin和家人以及核质运输。 2 在发现tna中发现核质运输路径 2.1 tin家族的trna运出核 tRNA在细胞核内被转录,需要穿越核膜进入细胞质参与蛋白质的翻译.理论上,小于40 ku的蛋白质和RNA,如tRNA(25 ku,直径6 nm),能借助扩散作用自由进出核.1998年发现专一性负责运送tRNA出核的载体蛋白,并命名为exportin-t,“export”+蛋白质后缀“in”,“t”指靶分子为tRNA.Exportin-t是importinβ家族的一员,分子质量为110 ku,p I为5.0,这是第一个被发现能直接结合RNA的importinβ家族成员.m RNA,rRNA都是和其他蛋白质形成复合物,被运出核外.exportin-t的作用机理如下:在细胞核内富含RanGTP,exportin-t和t RNA以及RanGTP形成复合物,穿过核孔,进入细胞质.细胞质中有RanGTP水解酶激活蛋白(RanGAP),将RanGTP水解为RanGDP,导致三元复合物解聚,释放出t RNA.Exportin-t最早在哺乳动物细胞中被发现,随后的序列分析在植物和酵母细胞中找到了exportin-t的同源蛋白,说明了这条途径的保守性.随后在高等动物中发现的另一条tRNA核质运输途径可能由exportin-5(136 ku)介导.Exportin-5是importinβ家族的另一成员,其主要作用是运输含双螺旋区的miRNA出细胞核,因而也能结合同样含双螺旋区的tRNA,亲和能力远小于miRNA,因而在高等动物的tRNA核质运输途径中的作用很小.在爪蟾卵母细胞中,exportin-t的浓度是t RNA转运出核的限速步骤,说明在高等动物中exportin-t转运是tRNA出核的主要途径. 2.2 exquit引导tnna优质物质运输，调节蛋白质合成 2.2.1 trna的修饰和转导 发现exportin-t后,德国研究小组深入研究exportin-t和tRNA的结合特性.在细胞核内,tRNA的产物由RNA聚合酶Ⅲ转录.最初的转录产物3′、5′端有多余的核苷酸,一些tRNA序列中间有内含子的存在.由前体t RNA转变为具有精确的5′端和3′CCA尾以及正确的空间结构的tRNA,需要对前体t RNA进行剪切,连接,修饰和3′端加CCA.显然,在核内存在着tRNA前体、tRNA中间体和成熟t RNA等多种tRNA分子.Exportin-t对具有正确三级结构成熟tRNA的结合能力远远大于其他tRNA中间体和前体tRNA,故能优先结合和转运成熟的tRNA出核.体外结合实验表明,和成熟tRNA相比,未修饰的tRNA、5′端有10个多余核苷酸的t RNA、3′端有10个多余核苷酸的t RNA以及5′和3′端各有10个多余核苷酸的tRNA,结合exportin-t的能力分别是成熟tRNA的18%,2.4%,7.2%,0.8%.正常生理条件下,有限的exportin-t在核内只能结合成熟的tRNA,保证了tRNA参与蛋白质翻译t RNA的效率.值得注意的是,在体外结合实验中,具有正确的5′和3′端,但有内含子的t RNA显示了与成熟tRNA相近的结合能力.在哺乳动物细胞核内,tRNA的内含子剪切步骤发生在tRNA末端成熟之前,在正常的环境中,带内含子的tRNA因没有正确的3′CCA末尾不能被运出核. 2.2.2 成熟trna分子的亲和能力和结合能力 Exportin-t能区分成熟tRNA和tRNA中间体的不同.但对于一个真核动物细胞而言,其中存在着40~50种的tRNA分子,转运21种