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化学性食物中毒的检验 中毒是指食用含有有毒有机物质的食物，或在食用含有有毒有机物质的食物后发生急性和亚急性疾病。根据《食物中毒诊断标准及技术处理总则GB 14938-94》,食物中毒按照致病因子可分为如下四类:微生物性(包括细菌和真菌)、化学性、有毒动植物及不明原因食物中毒。 化学性食物中毒是指由于食用了被有毒有害化学物污染的食品、被误认为是食品以及食品添加剂或营养强化剂的有毒有害物质、添加了非食品级的或伪造或禁止食用的食品添加剂和营养强化剂的食品、超量使用了食品添加剂的食品或营养素发生了化学变化的食品等引起的食物中毒。这类中毒具有发病急、中毒症状重、原因难查、致死率高等特点。卫生部办公厅通报的数据显示,2011年我国食物中毒共发生189起、中毒人数8324人、死亡人数137人,其中化学性食物中毒发生30起、中毒人数730人、死亡人数57人,化学性食物中毒死亡人数占全年食物中毒死亡人数的41.6%。因此,化学性食物中毒所产生的社会影响往往更大。应对这类食物中毒事件时,快速有效地确定致毒物质是后续临床治疗的关键。此外,我国每年都有一定数量的食物中毒事件找不到中毒原因,为此开展食物中毒因子筛查技术研究势在必行。 从目标物范围来看,化学性食物中毒因子筛查技术可分为两部分:目标毒物(某一种或者某一类毒物)的快速筛查检测技术以及非目标型毒物筛查确证技术。本文将对这两个方面进行综述。 1 禁止使用的物质 特定有毒有害物质快速筛查技术主要是针对高发、高危及国家规定禁止使用或限量使用的化学物质。常见的有亚硝酸盐、农药、杀鼠剂、国家管制的麻醉药品、精神药品、生物毒素及部分兽药等。 1.1 亚硝酸盐的检测方法 亚硝酸盐摄入体内后会使血液中Fe2+转化为Fe3+,使正常血红蛋白转化为高铁血蛋白,失去携氧能力,造成急性中毒,可危及生命。我国亚硝酸盐中毒事件发生频繁,最近的几起较大食物中毒事件包括2010年8月北京某烩面馆亚硝酸盐中毒、2010年10月四川海螺沟中毒以及2011年4月甘肃平凉散装奶中毒事件;2013年5月7日,宁波一面馆发生了一起28人染病的亚硝酸盐中毒事件。亚硝酸盐的快速检测方法主要采用纸片法,即重氮偶合法。显色剂为固体格利斯试剂(对氨基苯磺酰胺和N-1-萘基乙二胺),其原理为硝酸盐与对氨基苯磺酰胺重氮化,再与N-1-萘基乙二胺产生偶合反应,生成紫红色偶氮染料。亚硝酸盐的实验室确证可采用分光光度法或离子色谱法,这也是食品中亚硝酸盐检测的国家标准方法。此外,毛细管电泳法、液相色谱荧光法也可用于亚硝酸盐的测定。 1.2 农药数据库的构建及其检测方法 《中华人民共和国农药管理条例》规定,农药是指具有预防、消灭或者控制危害农业、林业的病、虫、草、鼠和其他有害生物以及能调节植物、昆虫生长的化学合成或者来源于生物、其他天然物质的一种或者几种物质的混合物及其制剂。按照功能和用途分类农药可分为杀虫剂、杀鼠剂、杀螨剂、除草剂、杀菌剂、植物生长调节剂等;按照组分分类,包括化学性农药(有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类、苯甲酰脲类等)、植物性农药(除虫菊、硫酸烟碱等)、生物性农药。农药对人体具有不同程度的危害作用。有机氯农药半衰期长、分解困难,容易在人体内富集,可引起慢性和急性中毒,对人体具有神经毒性和肝脏毒性,我国在1983年已经禁止使用。杀鼠剂的毒性很大,由其造成的食物中毒在我国时有发生,该部分在下一小节单独讨论。 据统计,我国使用的农药中有机磷类大约占70%,其中剧毒、高毒又占七成。由于有机磷农药的高效性和持久性,其不规范使用造成了很大的安全隐患,特别是蔬菜和果品尤为严重,中毒事件频繁发生。南京某医院1988年1月~2004年6月收治的502例中毒病例中有82.76%属有机磷农药中毒我国农业部宣布从2007年1月1日起禁止使用甲胺磷、对硫磷、甲基对硫磷、久效磷和磷铵5种有机磷农药。目前针对有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速测定方法根据检测原理的不同大致可分为两种,一种根据有机磷农药对乙酰胆碱脂酶的抑制作用,另一种方法是建立在特异性抗体识别基础上的免疫胶体金试纸检测方法。快检方法包括速测卡法、酶抑制率法和免疫胶体金试纸法。其中有机磷和氨基甲酸酯的速测卡法(GBT5009.199-2003)和酶抑制率法(GBT5009.199-2003)已被列为国家标准。 农药的实验室确证技术需要采用气相色谱法(gas chromatography,GC)、液相色谱法(liquid chromatography,LC)、气相色谱-质谱法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)、液相色谱-质谱法(liquid chromatography-mass spectrography LC-MS)等实现。其中,GC-MS技术通过自动质谱