曲克芦丁脑蛋白水解物中16种氨基酸的测定.docxVIP

曲克芦丁脑蛋白水解物中16种氨基酸的测定 氨基乙醇钠蛋白质水处理药物可用于治疗心脑血管疾病、脑出血和脑痉挛等急性心脑血管疾病。它对治疗中风和脑损伤引起的大脑障碍和其他疾病也有很好的治疗效果。曲克芦丁脑蛋白水解物为复方制剂,包含曲克芦丁、活性多肽、多种氨基酸、核酸等多种成分,这些成分对游离氨基酸的分析干扰较大,因此现行检验标准中无氨基酸的含量测定方法。本实验采用PITC柱前衍生,HPLC法梯度洗脱测定曲克芦丁脑蛋白水解物中16种氨基酸的含量,取得了满意的结果。 1 仪器和试剂盒 1.1 仪器 Waters 2695高效液相色谱,Waters 2487紫外检测器,Empower2色谱工作站。 1.2 药品化学品检定所 16种氨基酸对照品(购自中国药品生物制品检定所);曲克芦丁对照品(购自中国药品生物制品检定所);正亮氨酸(购自SIGMA公司);曲克芦丁脑蛋白水解物(哈尔滨松鹤制药有限公司提供,批号060201);PITC(购自Alfa Aesar公司);乙腈(色谱纯);三乙胺(色谱纯);醋酸钠(分析纯);双蒸水。 2 方法和结果 2.1 ll-1-1乙腈溶液流动相及洗脱程序 Venusil AA氨基酸分析专用色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温35℃;流动相A:0.03mol·L-1醋酸钠缓冲液(p H6.50)-乙腈(355:14),流动相B:乙腈-水(80:20),流速