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井穴刺络放血对健康小鼠耐缺氧时间的影响 古代文献中已有12种针灸方法的记载，如针灸大成。“风、中风、跌倒、死亡、头晕、用三角帆针手针十二穴，消除邪恶的血液，治愈所有风暴和邪恶的事情。不必说别人的工作，以免瘫痪和大便。”《古今医鉴》也指出:“一切初中风、中气,昏到不知人事,急以三棱针刺手中指甲角十二井穴,将去恶血。”近年来,我们从临床和实验研究等方面对此进行了大量研究,揭示了手十二井穴刺络放血法在治疗急性中风、改善脑缺血缺氧的部分机制。但是,我们的研究大都集中于多个井穴同用,对单个井穴的研究较少。鉴于此,我们开展本实验,旨在观察十二井穴在单用或联合应用时是否存在差异,以便为临床应用提供依据。 1 材料和方法 1.1 放养g,统一饲养 健康小鼠144只,雌雄不限,体质量(18.0～31.0)g,统一喂养;室温:(20±2)℃,相对湿度:(25±3)%,12 h明暗交替,适应性喂养1周。 1.2 实验设备 针灸针(华佗牌,0.17 mm × 7 mm),毛细吸管,125 ml广口瓶,钠石灰(上海五四化学试剂有限公司),凡士林,钟表等。 1.3 小鼠分组及分组 先将小鼠编号、称重后,按体质量进行分层随机,分为少商组、商阳组、关冲组、少泽组、中冲组、少冲组、综合组和对照组,共8组,每组18只小鼠。 1.4 实验方法 1.4.1 井穴点刺出血 固定小鼠,根据分组情况点刺相应井穴(小鼠十二井穴定位根据比较解剖学进行井穴定位,相当于人的“手十二井穴”解部位置),取双侧前肢井穴,每穴以点刺出血,进针0.5 cm,出血量约为医用毛细吸管0.5 cm高度。空白对照组只在相同时间固定而不予点刺;综合组则在上述6个井穴点刺出血。实验时间15:00～22:00之间。 1.4.2 呼吸停止试验 刺络放血后,将小鼠立即装入盛有3 g钠石灰的等容量广口瓶中(瓶口涂抹凡士林),每瓶放1只小鼠,迅速盖紧盖子,记录小鼠从装入瓶内到呼吸停止的时间(呼吸停止的标准:小鼠不再挣扎,四肢瘫软,即使晃动广口瓶也无任何反应)。 1.5 统计方法 应用SPSS 15.0统计软件。实验数据用xˉ±sxˉ±s表示,采用方差分析进行统计处理。 2 小鼠的耐缺血压比,总组大学生耐缺血压较少,综合组小鼠耐缺血压较少,总组小鼠耐缺血压较高,总组小鼠耐缺血压病长 在实验过程中,有些小鼠因夹住尾巴出血、小鼠假死等原因导致样本脱落。与各井穴组比较,对照组小鼠耐缺氧时间最短,且与商阳组、中冲组比较有显著性差异(P0.05)。在各井穴组中,商阳组小鼠耐缺氧时间最长,且与少商组、少泽组、综合组比较有显著性差异(P0.05);而综合组小鼠耐缺氧时间短长于少商组、少泽组,不及少冲组、关冲组和中冲组,但均无统计学意义。提示井穴放血可以改善急性脑缺血缺氧状态,以商阳穴效果最为显著。见表1。 3 井穴与井穴间注血对小鼠耐缺时间的影响 氧是维持生命活动所必需的物质,由于某种原因引起机体严重缺氧时,一些重要器官就会死亡,特别是大脑。十二井穴刺络放血可以明显改善缺血区脑组织的急性缺氧已为众多学者所共识,该项急救技术也于2007年被国家中医药管理局评选为第二批中医临床适宜技术推广计划项目。前期我们从生物化学、电生理学等方面论述了此疗法对脑缺血时脑保护的作用机制。现在有学者从皮层投射理论上提出其耐缺氧机制可能与四指在大脑皮层的投射面较大有关,但小鼠各“手指”在大脑皮层的投射区域及比例与人是否相同,还有待进一步研究。 十二井穴多位于手足之端,喻水之源头,是经气所出的部位,具有泄热逐瘀、开窍启闭、护脑醒神等功效,主要用于治疗热病、急症等,但是否需要十二井穴同时放血?手十二井穴刺络放血的简化研究结果显示,手十二井穴刺络放血可以简化为手六井穴刺络放血,其效应基本相似。本实验结果表明,少冲组、关冲组及中冲组小鼠刺络放血耐缺氧时间均长于综合组,但无统计学意义,可能与各组样本数较少有关。 少商是临床上常用于放血的井穴,主治咽喉肿痛等症。但在本实验中,少商放血后的耐缺氧时间却明显短暂。《素问·血气形志》篇云:“夫人之常数,太阳常多血少气,少阳常少血多气,阳明常多气多血,少阴常少血多气,厥阴常多血少气,太阴常多气少血,此天之常数。”根据十二经气血多少,有人主张:气少之经不宜深刺,以免诛伐太过,耗伤正气,血少之经不宜出血。商阳为多气多血之阳明经的井穴,故商阳效果最好,且与少商组、少泽组、空白对照组、综合组比较有显著性差异(P0.05)。也有人主张,多血少气之经,可采用刺络放血法,少用或不用毫针泻法;多气少血之经,采用毫针泻法,不宜刺络放血。根据此理论,商阳、中冲、少泽都属多血之经脉,可采用刺络放血法;少商、关冲及少冲都属少血之经脉,不宜刺络放血。本实验中,商阳、中冲刺络放血后,小鼠耐缺氧时间较长;少商刺络放血后,小鼠耐缺氧时间较短,但同属多