铁皮石斛离体培养及植株再生体系的建立.docxVIP

铁皮石斛离体培养及植株再生体系的建立 0 发酵铁皮石斛的繁殖与繁殖 剥皮属植物，也被称为黑节草，俗称枫豆科。分布于云南、安徽、贵州、浙江、江西、广东和广东。它不仅是珍贵的室盆花，也是珍贵的中药。铁皮石斛的有性繁殖极为困难,其种子极为细小,胚胎发育不完全,无胚乳组织,在自然状态下发芽率极低,苛刻的生长环境,也限制了其有性繁殖。何平荣等研究表明,铁皮石斛平均自然结实率为0.31%。铁皮石斛主要靠根部无性分蘖繁殖而不断生出新的植株并成丛生长,有时也从上部茎节处生根长出新植株。而常规条件下人工繁殖又较难,不能满足日益增长的市场需求,随着人们对它的深入研究与广泛利用,需要大量的石斛作为原料投入药品的研制与生产,因此,研究培养石斛和开发铁皮石斛具有重要的意义,长期以来组织培养在植物生产中得到广泛应用,是产生极大经济效益的一项生物技术。 1 材料和方法 1.1 试验材料 云南铁皮石斛,取其茎段、叶片作为外植体进行组织培养。 1.2 测试方法 1.2.1 反复冲洗法 取铁皮石斛茎,去除多余叶片后用解剖刀将茎切成含3～4个节点的茎段,保留节点。清水冲洗3 min,用70%的乙醇浸泡10～60 s,再转入0.1%的氯化汞中,灭菌5～11 min后倒去氯化汞溶液,用无菌水反复漂洗材料3遍以上。用无菌纸吸去茎段上多余水分,将其切成1～2 cm带一个芽点的茎段,接种到培养瓶中培养。 1.2.2 分离的培养