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新型酮康唑缓释喷膜的制备及药效学研究 湿疹、皮炎和皮肤癣是皮肤科常见病。部队基层官兵由于特殊的作训环境,这两类疾病发病率高达60%左右。目前用于防治这两类疾病的药物剂型主要有软膏剂、洗剂、溶液剂等,各剂型作用相对单一。本研究采用壳聚糖盐酸盐为成膜辅料,研制一种集抗真菌、抗炎、抗过敏一体的长效缓释喷膜,对其质量控制进行了研究,并观察其对豚鼠湿疹和体癣模型的疗效。 1 材料表面 1.1 仪器、试药 Waters高效液相色谱仪:Waters 600色谱泵,Waters 996PDA紫外检测器,Millennium 32色谱工作站(梅特勒-托利多公司);超声振荡机(上海科学仪器厂);超滤仪(上海科学仪器厂);电子分析天平(梅特勒-托利多公司);梅特勒320 pH计(梅特勒-托利多公司)。酮康唑(地奥集团成都药业股份有限公司,批号:030902);醋酸地塞米松(天津天药药业股份有限公司,批号:DAG030801);壳聚糖盐酸盐(上海其胜生物材料技术研究所,平均相对分子质量100 000,批号:030308);吐温-80、水溶性硅油、乙醇等均符合药用标准。酮康唑对照品、醋酸地塞米松对照品(中国药品生物制品检定所);自制酮康唑喷膜(批号:030818,030822,030824)。磷酸二氢钾和氢氧化钠(上海试剂四厂,分析纯)、甲醇(上海复旦化学品厂永华试剂分厂,色谱纯)。 1.2 性别、体复杂模型 4~5周龄健康豚鼠55只,由第二军医大学实验动物中心提供,合格证号:SYXK-(军)2002-044。其中用于湿疹模型25只,均为雌性,体质量(232.4±33.0)g;用于体癣模型20只,雌雄各半,体质量(212.4±18.7)g;用于皮肤刺激性实验10只,雌雄各半,体质量(218.6±16.2)g。 2 方法和结果 2.1 新型酮康唑喷膜的制备 2.1.1 壳聚糖盐酸盐的制备 酮康唑10 g,醋酸地塞米松0.5 g,壳聚糖盐酸盐10 g,吐温-80 10 g,水溶性硅油10 g,60%乙醇加至1 000 ml。 2.1.2 乙醇溶液的配制 取处方量的壳聚糖盐酸盐加适量纯化水胀溶,取处方量酮康唑、醋酸地塞米松加乙醇溶解,再加入吐温-80,将上述醇溶液缓慢加入水溶液中。最后加水溶性硅油,搅匀,分装于60 ml喷瓶,密闭,即得。 2.2 新醇康唑喷膜的质量标准 2.2.1 断裂 本品为无色黏稠液体,有乙醇味。 2.2.2 红色沉淀的制备 酮康唑鉴别:取样品1 ml,加0.1 mol/L盐酸溶液10 ml,在水浴上加热溶解,放冷,滤过,滤液加碘化铋钾试液数滴,即生成橙红色沉淀。醋酸地塞米松鉴别:取样品10 ml,置烧杯中,加无水乙醇50 ml,在水浴上加热溶解,放冷,滤过,滤液加碱性酒石酸铜试液1 ml,即生成红色沉淀。3批样品鉴别均呈阳性反应。 2.2.3 玻璃板上干燥 应符合《中国药典(2000年版)》二部有关膜剂的一般规定,将本品涂于干净玻璃板上,应在10 min内干燥成膜,膜应有一定抗撕裂强度,微生物限度检查应符合规定。3批样品均符合相关要求。 2.3 新醇康唑喷膜含量的测定和方法学的研究 2.3.1 对照品溶液5.2% 精密称取酮康唑和醋酸地塞米松对照品适量,加乙醇分别配制酮康唑对照品溶液(1 mg/ml)和醋酸地塞米松对照品溶液(1 mg/ml)。另按2.1.1项下配制新型酮康唑喷膜样品和空白喷膜基质,分别精密量取上述喷膜4.0 ml,置50 ml容量瓶中,加乙醇适量,超声振荡10 min,加乙醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜滤过,配制酮康唑喷膜测定液和空白喷膜测定液。 2.3.2 流动相、色谱相 色谱柱Waters Symttry C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-磷酸二氢钾缓冲液(4∶1),pH 7.4;检测波长:239 nm;流速:0.6 ml/min;柱温:(22±2)℃;进样量:20 μl。色谱图见图1。辅料不干扰样品中主药酮康唑和醋酸地塞米松的含量的测定。 2.3.3 标准曲线的建立 精密称取酮康唑和醋酸地塞米松对照品溶液适量,加乙醇稀释成酮康唑浓度为0.2、0.4、0.8、1.6和2.0 mg/ml和醋酸地塞米松浓度为0.02、0.04、0.08、0.16和0.20 mg/ml的标准溶液,进样按2.3.2项下条件。以峰面积(A)对浓度(c)求回归方程,酮康唑:A1=(5.984×105)+(3.063×107)c1,r1=0.999 7;醋酸地塞米松:A2=(1.947×104)+(4.123×107)c2,r2=0.999 8。酮康唑和醋酸地塞米松的线性范围分别为0.2~2.0 mg/ml和0.02~0.20 mg/ml。 2.3.4 平均回收率的测定 精密量取样品4.0 ml,置50 ml容量瓶中