食品中菌落总数检验方法学验证 .pdfVIP

菌落总数检验方法学验证报告 一、验证目的 验证GB4789.2-2016 《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数的测定》 在本实验室的适用性。 二、验证方法 严格按照GB4789.2-2016 进行实验，样品采样方案依据GB4789.1-2016 《食 品微生物学检验 总则》的要求进行，本实验方法设计如下： 样品种类 样品名称 样品编号 实验人员 实验方法 糕点 xxx xxx a、b 双人双平行 蜂蜜 xxx xxx c、a 双人双平行 汽水 xxx xxx c、b 双人双平行 除上述实验程序外，为保证本次验证的科学性和准确性，本次实验添加阳性对 照组，对照组由标准菌株大肠埃希氏菌 （CICC10389 ），金黄色葡萄球菌 （CICC10384 ），枯草芽孢杆菌（CICC10275 ）混合接种培养而成，与样品实验程序 同时进行。 三、验证设备和试剂 1. 冰箱：BCD-212DG/A 海信 （北京）电器 2. 生化培养箱：LRH-70 上海一恒科学仪器 3. 电位pH 计：PHS-3C+ （精确度0.01 ） 成都世纪方舟科技有限公司 4. 无菌均质器：SCIENTZ-04 宁波新芝生物科技有限公司 5. 恒温振荡器：SHA-A 江苏金坛环宇科学仪器厂 6. 菌落计数仪：Scan-500 北京五洲东方科技发展有限公司 7. 天平:JE-502 上海浦春计量仪器有限公司 8. 超净工作台:SW-CJ-2FD 上海博迅实业 培养基和试剂： 1. 平板计数琼脂培养基 北京陆桥技术股份有限公司 2. 无菌生理盐水见附录A 配制方法 四、验证环境 1 1. 依据《消毒与灭菌效果的评价方法与标准GB15981-1995 》定期对高压蒸汽灭菌 锅的灭菌效果进行检测评价并记录； 2. 依据《无菌室消毒灭菌操作规程》定期对对无菌室、生物安全柜、超净台进行 清洁消毒灭菌并记录； 3. 依据《实验室质量控制规范食品微生物检测GB/T27405-2008》定期对对无菌室、 生物安全柜及超净台进行沉降菌检测并记录； 4. 无菌室检验：详见《xxx 疾病预防控制中心检验报告书xxx 》； 五、验证步骤 1. 样品的稀释 1.1 固体和半固体样品：称取25 g 样品置盛有225 mL 生理盐水的无菌均质袋中， 用拍击式均质器拍打1 min～2 min，制成1:10 的样品匀液。 1.2 液体样品：以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL 生理盐水的无菌锥形 瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10 的样品匀液。 1.3 用1 mL 移液枪吸取1:10 样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL 生理盐 水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管使其混合 均匀，制成1:100 的样品匀液。 1.4 按1.3 操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀液。 1.5 根据对样品污染状况的估计，选择2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体 样品可包括原液），在进行10 倍递增稀释时，吸取1 mL 样品匀液于无菌平皿内， 每个稀释度做两个平皿。同时，分别吸取1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内 作空白对照，分别吸取1 mL 混合标准菌液加入两个无菌平皿内作阳性对照。 1.6 及时将15 m