第十三单元综合性实验.pptVIP

实验一 酶联免疫吸附实验检测 伤寒O抗体方法的建立 （综合性实验） 当前第1页\共有36页\编于星期三\9点 实验原理 检测伤寒O抗体在伤寒菌感染的诊断中具有重要意义，采用肥达反应可对抗体进行半定量检测；若采用新一代的免疫检测技术建立对伤寒O抗体准确定量检测的法，则可提高临床诊断效果。以伤寒O抗原免疫动物，制备出抗伤寒O的抗体，将后者纯化抗体与酶连接制备成酶标抗体;以伤寒O抗原包被酶标板，制备伤寒酶标抗体为竞争抗体，以竞争法检测伤寒抗体酶联免疫检技术。 当前第2页\共有36页\编于星期三\9点 1. 伤寒沙门菌菌体“O”抗原（免疫用） 2. 伤寒沙门菌可溶性菌体“O”抗原（包备用） 3. 饱和硫酸铵溶液 4. 酶标用洗涤液 5. 酶标用稀释液 6. 酶标用底物液 7. 酶标用终止液 (2mol/L H2SO4 ) 8. 伤寒“O”抗原包被酶标板 9. 待检血清标本　 10.实验室标准阳性血清 11.ELISA读数仪　 实验材料 当前第3页\共有36页\编于星期三\9点 制备抗伤寒O抗体和O抗原 抗体纯化 酶(HRP)标记抗体 竞争ELISA检测伤寒O抗体条件的优化 标准曲线确定 标本检测与结果判断 实验流程 当前第4页\共有36页\编于星期三\9点 取伤寒