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- 2023-09-14 发布于广东
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第二节 器皿用具 一、组培器皿 (一)器皿的类型 培养器皿 分注器 离心管 刻度移液管 细菌过滤器 当前第31页\共有65页\编于星期二\6点 1.培养器皿 (1)概念 培养器皿---指用于盛放培养基和接种培养材料的器皿。要求透光度好,能耐高压灭菌。 当前第32页\共有65页\编于星期二\6点 (2)类型 按材料分: 玻璃培养器皿:优点是透光度好、容易清洗;缺点是容易破碎; 塑料培养器皿:优点是不容易破碎、成本较低,但缺点是透光度较玻璃的差、遇火焰易被熔化。 当前第33页\共有65页\编于星期二\6点 按形状分 试管——特别适合于用少量培养基及试验各种不同配方时选用,在茎尖培养及花药和单子叶植物分化长苗培养时更显方便。有圆底的和平底的两种。 三角瓶——是植物组织培养中最常用的培养器皿,适合于各种培养,固体或液体、大规模或小规模都行。 其优点是:采光好、瓶口较小不易失水和污染。 L形管和T形管——为专用的旋转式液体培养试管。 培养皿——适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽。 角形培养瓶和圆形培养瓶——适于液体培养用。 果酱瓶——常用于试管苗大量繁殖,200ml-500ml规格 当前第34页\共有65页\编于星期二\6点 2.分注器 作用---分装培养基。 分注器可以把配置好的培养基按一定量注入到培养器皿中。一般由4cm-6cm的大型滴管、漏斗、橡皮管及铁夹组成。还有量筒式的分注器,上有刻度,便于控制。微量分注还可采用注射器。 当前第35页\共有65页\编于星期二\6点 3.离心管 离心管用于离心,将培养的细胞或制备的原生质体从培养基中分离出来,并进行收集。 当前第36页\共有65页\编于星期二\6点 4.刻度移液管 在配制培养基时,生长调节物质和微量元素等溶液,用量很少,只有用相应刻度的移液管才能准确量取。同时,不同种类的生长调节物质,不能混淆,这就要求专管专用。常用的移液管容量有0.1ml、0.2ml、0.5ml、2ml 、5ml、10ml等。 当前第37页\共有65页\编于星期二\6点 移液器 当前第38页\共有65页\编于星期二\6点 培养基中有些生长调节物质以及有机附加物质如吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA)等,在高温条件下易被分解破坏,而用细菌过滤器(图1—7)既可除菌又可保持试剂的功效。可用金属制的蔡式漏斗,以石棉滤膜来除去细菌。在过滤少量的液体时,宜用醋酸纤维素和硝酸纤维素混合物制成的微孔滤膜,其孔径为0.45μm。在过滤时需要一套减压吸滤设备(通常使用真空泵),漏斗下接吸滤瓶,吸嘴处接上一只内装脱脂棉的滤气玻璃管。 5.细菌过滤器 当前第39页\共有65页\编于星期二\6点 图1—7 细菌过滤器灭菌装置 当前第40页\共有65页\编于星期二\6点 (二)器皿的清洗 植物组织培养除了要对待培养的实验材料 和接种用具进行严格消毒外,各种培养器皿也 要求洗涤清洁,以防止带入一些有毒的或影响 培养效果的化学物质或一些微生物等,对那些 常用的玻璃器皿的清洁程度要求更为严格。 当前第41页\共有65页\编于星期二\6点 1.洗涤剂——清洗玻璃器皿用的洗涤剂主要有肥皂、洗洁精、洗衣粉和铬酸洗涤液(由重铬酸钾和浓硫酸混合而成)。 配制铬酸洗涤液的注意事项:(1)在配制时重铬酸钾一定要冷却后才能加浓硫酸,且只能把浓硫酸缓慢加入重铬酸钾溶液中,决不能将重铬酸钾溶液或蒸馏水倒入浓硫酸中。(2)由于铬酸洗涤液具有极强的氧化能力和腐蚀作用,故不要用手直接接触洗涤液。 当前第42页\共有65页\编于星期二\6点 2.洗涤方法 使用前先用1%稀盐酸浸泡1 夜,然后用肥皂水洗净,清水冲洗,最后用蒸馏水冲淋1遍,干后备用。 已用过的玻璃器皿洗涤方法:去残渣——水洗——热肥皂水(或洗洁精)——水洗——蒸馏水冲洗1次。 较脏的玻璃器皿的洗涤:洗衣粉或洗洁精刷洗几次并冲净——浸入洗涤液中——流水中冲洗——蒸馏水冲洗。 当前第43页\共有65页\编于星期二\6点 已被霉菌等杂菌污染的玻璃器皿的洗涤: 121℃高温高压蒸汽灭菌30min——趁热倒去残 渣——清水中冲洗——浸泡在浓的重铬酸钾洗 涤液中——2h后取出——水洗数次——蒸馏水 冲淋1次。 用过的吸管和滴管的清洗:洗涤液中浸泡 2h以上——取出在流水中冲洗半小时——蒸馏 水冲淋1次。 当前第44页\共有65页\编于星期二\6点 用过的载玻片和盖玻片的清洗: 洗涤液中浸泡数小时——水洗——绸布擦干——放在95%的洒精中备用。 总之,要求洗
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