门静脉间质细胞自发性内向电流特性及牵张刺激对其调控作用的中期报告.docxVIP

门静脉间质细胞自发性内向电流特性及牵张刺激对其调控作用的中期报告 本研究旨在研究门静脉间质细胞自发性内向电流的特性以及牵张刺激对其调控作用。本中期报告主要介绍实验设计和初步结果。 实验设计： 1. 制备门静脉间质细胞（HSCs）原代培养。从健康的Sprague-Dawley 大鼠中提取HSCs，并进行原代培养。 2. 离子电流记录。使用全细胞膜片钳技术记录HSCs中的自发性内向电流。记录条件：室温下进行，外液配制：NaCl 140mmol/L, KCl 5.4 mmol/L, CaCl2 2.5 mmol/L, MgCl2 1 mmol/L, HEPES 5 mmol/L, D-glucose 10 mmol/L; 内液配制：KCl 130 mmol/L, NaCl 10 mmol/L, CaCl2 1 mmol/L, MgCl2 2mmol/L, HEPES 10 mmol/L, EGTA 11 mmol/L, Mg-ATP2- 4 mmol/L, pH 7.2。 3. 并行应变记录。使用端点偏差法记录门静脉细胞内的牵张应力情况。记录条件：室温下进行，记录设备：光学显微镜+镜头+应力计。 初步结果： 1. 我们成功制备了门静脉间质细胞的原代培养，并确认其为纯化的HSCs。 2. 目前已记录到HSCs自发性内向电流的存在，但尚未完全分析其特性，如电位激发模式、离子通道类型等。 3. 我们使用端点偏差法记录了门静脉组织的牵张应力，并观察到牵张应力的持续存在。 结论： 在目前的实验条件下，我们已经初步实现了门静脉间质细胞自发性内向电流和组织牵张应力的记录，但数据分析和结果验证尚需进一步实验。我们将继续进行实验，并优化实验条件，以期获得更加准确的结果，并在马上的最终报告中进行详细分析和讨论。