化妆品常用植物提取物中16种香豆素类化合物测定 液质联用法（征求意见稿）.docx

第 1 页 T/FSBMEA XXXX—XXXX 化妆品常用植物提取物中 16 种香豆素类 化合物的测定 液质联用法 1 范围 本文件规定了化妆品中常用植物提取物中 16 种香豆素类化合物的液质联用测定方法。 本文件适用于液体类常用植物提取物中 16 种香豆素类化合物的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期 的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括 所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 样品提取后，采用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测。根据保留时间和特征离子对 的相对丰度比定性、定量离子对峰面积定量， 以标准曲线法计算含量。 5 试剂 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 5.1 乙腈：色谱纯。 5.2 甲酸：色谱纯。 5.3 甲醇：色谱纯。 5.4 0.1%甲酸溶液：取 1 mL 甲酸（5.2）用水定容至 1000 mL，混匀。 5.5 标准品：香豆素、7-羟基香豆素、补骨酯素、7-甲基香豆素、异补骨酯素、8-甲氧基补 骨酯素、欧前胡素、异欧前胡素、6,7-二甲氧基香豆素、新补骨酯异黄酮、补骨酯二氢黄酮、 4-甲基-7-羟基香豆素、4-甲基-7-乙氧香豆素、5-甲氧基补骨酯素、2,4,8-三甲基补骨酯素、 环香豆素标准品纯度均≥98%。 5.6 标准储备溶液：称取香豆素、7-羟基香豆素、补骨酯素、7-甲基香豆素、异补骨酯素、 8-甲氧基补骨酯素、欧前胡素、异欧前胡素、6,7-二甲氧基香豆素、新补骨酯异黄酮、补骨 酯二氢黄酮、4-甲基-7-羟基香豆素、4-甲基-7-乙氧香豆素、5-甲氧基补骨酯素、2,4,8- 三甲基补骨酯素、环香豆素各 10 mg（精确到 0.00001 g），分别置于 10 mL 棕色容量瓶中， 用甲醇(5.3)溶解并定容至刻度，混匀。制成标准储备溶液的质量浓度均为 1000 mg/L。置 于-18 ℃以下冰箱中保存，有效期 3 个月。 第 2 页 T/FSBMEA XXXX—XXXX 5.7 混合标准中间溶液：准确移取各标准储备溶液适量置于 20 mL棕色容量瓶中，用甲醇(5.3) 并定容至刻度，摇匀，制成配制香豆素质量浓度范围约为 80 μg/mL，7-羟基香豆素、补骨 酯素、7-甲基香豆素、异补骨酯素、8-甲氧基补骨酯素质量浓度范围约为 40μg/mL，欧前 胡素、异欧前胡素、6,7-二甲氧基香豆素、新补骨酯异黄酮、补骨酯二氢黄酮质量浓度范围 约为 8.0μg/mL ，4-甲基-7-羟基香豆素、4-甲基-7-乙氧香豆素、5-甲氧基补骨酯素、2,4,8- 三甲基补骨酯素、环香豆素质量浓度范围约为 4.0 μg/mL 的混合标准中间溶液。置于-18 ℃ 中避光保存，有效期 1 个月。 5.8 混合标准工作溶液的制备：精密移取适量混合对照品中间溶液，用甲醇(5.3)配制香豆 素质量浓度范围约为 0.20 μg/mL～8.0 μg/mL，7-羟基香豆素、补骨酯素、7-甲基香豆素、 异补骨酯素、8-甲氧基补骨酯素质量浓度范围约为 0.10 μg/mL～4.0 μg/mL，欧前胡素、 异欧前胡素、6,7-二甲氧基香豆素、新补骨酯异黄酮、补骨酯二氢黄酮质量浓度范围约为 0.02 μg/mL～0.80 μg/mL ，4-甲基-7-羟基香豆素、4-甲基-7-乙氧香豆素、5-甲氧基补 骨酯素、2,4,8-三甲基补骨酯素、环香豆素质量浓度范围约为 0.01 μg/mL～0.40 μg/mL 的混合标准工作溶液，具体浓度见表 1。 表 1 香豆素等 16 种组分的基质混合标准工作溶液浓度 序号 名称 混合基质标准工作溶液浓度( μg/mL） 1 香豆素 0.20 0.50 1.0 2.0 4.0 8.0 2 7-羟基香豆素 0.10 0.25 0.50 1.0 2.0 4.0 3 补骨酯素 0.10 0.25 0.50 1.0 2.0 4.0 4 7-甲基香豆素 0.10 0.25 0.50 1.0 2.0 4.0 5 异补骨酯素 0.10 0.25 0.50 1.0 2.0 4.0 6 8-甲氧基补骨酯素 0.10 0.25 0.50 1.0 2.0 4.0 7 欧前胡素 0.02 0.05 0.10 0.20 0.40 0.80 8 异欧前胡素 0.02 0.05 0.10 0.20 0.40 0.80 9 6,7-二甲氧基香豆素 0.02 0.05 0.10 0.20 0.40 0.80 10 新补骨酯异黄酮 0.02 0.05 0.10 0.20 0.