生物化学和分子生物学：18 基因表达调控.pptVIP

* * * * * * 30bp 双链RNA（dsRNA） 水解生成 21-23nt siRNA 5’ 3’ 3’ 5’ RISC形成 识别特异序列 并使其降解 RNA干扰作用机制 siRNA miRNA 前体 内源或外源长双链RNA诱导产生 内源发夹环结构的转录产物 结构 双链分子 单链分子 功能 降解mRNA 阻遏其翻译 靶mRNA 结合 需完全互补 不需完全互补 生物学效应 抑制转座子活性和病毒感染 发育过程的调节 siRNA 和miRNA的差异比较 * A comparison between miRNA and siRNA （五）长链非编码RNA在基因表达调控中的作用不容忽视 长链非编码RNA（lncRNA）是一类转录本长度超过200个核苷酸的RNA分子，不直接参与基因编码和蛋白质合成，但是可在表观遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 六、转录后调控主要影响真核mRNA的结构与功能 （一）mRNA稳定性的影响真核生物基因表达 5?-端的帽子结构可以增加mRNA的稳定性 3?-端的poly(A)尾结构防止mRNA降解 RNA无论是在核内进行加工、由胞核运至胞浆，还是在胞浆内停留（至降解），都是通过与蛋白质结合形成核蛋白颗粒(ribonucleoprotein, RNP)进行的。 与原核基因表达调节一样，某些小分子RNA也可调节真核基因表达。 这些RNA都是非编码RNA（noncoding RNA, ncRNA）。如：具有催化活性的RNA（核酶）、细胞核小分子RNA （snRNA）以及核仁小分子RNA（snoRNA） 目前人们广泛关注的非编码RNA有miRNA和siRNA。 小分子RNA对基因表达的调节十分复杂， （二）一些非编码小分子RNA可引起转录后基因沉默 （三）mRNA前体的选择性剪接可以调节真核生物基因表达 真核生物基因所转录出的mRNA前体含有交替连接的内含子和外显子。通常状态下，mRNA前体经过剔除内含子序列后成为一个成熟的mRNA，并被翻译成为一条相应的多肽链。但是，参与拼接的外显子可以不按照其在基因组内的线性分布次序拼接，内含子也可以不完全被切除，由此产生了选择性剪接 七、真核基因表达在翻译以及翻译后仍可受到调控 （一）对翻译起始因子活性的调节主要通过磷酸化修饰进行 蛋白质合成速率的快速变化在很大程度上取决于起始水平，通过磷酸化调节翻译起始因子（eukaryotic initiation factor, eIF）的活性对起始阶段有重要的控制作用。 1．翻译起始因子eIF-2α的磷酸化抑制翻译起始 例1：血红素通过抑制HCI激酶进而抑制eIF-2α的磷酸化促进珠蛋白合成 否定之否定=肯定 HCI:heme-controlled inhibitor （血红素控制的抑制剂） eIF参与起始Met-tRNAi的进位 例2：细胞抗病毒作用机制: 干扰素诱导的蛋白激酶 dsRNA 干扰素诱导eIF2磷酸化而失活，抑制蛋白质合成起始 ATP eIF2 ADP eIF2-P（失活） Pi 磷酸酶 2．eIF-4E及eIF-4E结合蛋白的磷酸化激活翻译起始 帽结合蛋白eIF-4E与mRNA帽结构的结合是翻译起始的限速步骤，磷酸化修饰及与抑制物蛋白的结合均可调节eIF-4E的活性。 磷酸化的eIF-4E与帽结构的结合力是非磷酸化 的eIF-4E的4倍，因而可提高翻译的效率。 种类 生物学功能 起始因子 eIF-1 多功能因子，参与翻译的多个步骤 eIF-2 促进Met-tRNAiMet与小亚基结合 eIF-2B 结合小亚基，促进大、小亚基分离 eIF-3 结合小亚基，促进大、小亚基分离；介导eIF-4F复合物-mRNA与小亚基结合 eIF-4A eIF-4F复合物成分；有RNA解螺旋酶活性，解除mRNA 5?-端的发夹结构，使其与小亚基结合 eIF-4B 结合mRNA，促进mRNA扫描定位起始AUG eIF-4E eIF-4F复合物成分，识别结合mRNA 的5?帽结构 eIF-4G eIF-4F复合物成分，结合eIF-4E、eIF-3和PAB eIF-5 促进各种起始因子从小亚基解离 eIF-6 促进大、小亚基分离 延长因子 eIF1-α 促进氨基酰-tRNA进入A位，结合分解GTP，相当于EF-Tu eIF1-βγ 调节亚基，相当于EF-Ts eIF-2 有转位酶活性，促进mRNA-肽酰-tRNA由A位移至P位，促进tRNA卸载与释放，相当于EF-G 释放因子 eRF 识别所有终止密码子，具有原核生物各类RF的功能 （二）RNA结合蛋白参与了对翻