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3.1 重组DNA技术的基本工具;基因工程:是指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫作重组DNA技术。;番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。我国华南农业大学的科研人员利用农杆菌转化法,将番木瓜环斑病毒株系Ys的复制酶基因转入番木瓜,成功培育出了转基因番木瓜“华农1号“。并于2006年获得生产应用安全证书,在广东大规模种植后,产生了极大的经济、社会和环境效益。从根本上解决了番木瓜生产受环斑病毒威胁的问题,从而恢复了番木瓜“岭南佳果”美誉,并供应国内外市场,也满足了食品工业、医药和保健等开发的需要。;在培育转基因番木瓜时,首先要在体外对含有所需要基因的DNA分子进行“切割”、改造和“拼接”; 然后, 将重组DNA分子导入番木瓜体细胞内,并使其在细胞中表达。;病毒株系Ys的复制酶基因能通过拼接并在番木瓜中表达出相同蛋白质的理论基础是:
(1)病毒株系Ys和番木瓜的遗传物质都是 。
(2)病毒株系Ys和番木瓜的DNA分子能够拼接在一起,原因是 。
(3)病毒株系Ys的复制酶基因在病毒株系Ys和番木瓜内表达出来的蛋白质相同,因为 。
(4)遗传信息的传递都遵循 。
总结:为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达?
;基因工程至少需要的三种“分子工具“;重组DNA分子;[资料1]1970年,史密斯(H.D.Smith)等人首次从大肠杆菌中提取出了一种限制性内切核酸酶(restriction endonuclease)。这种内切核酸酶能够识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特异性的位点上把双链DNA分子“切割”开(如图)。DNA被切割后所产生的交错的切口,也就是在每条链的一端留下的单链末端,叫做黏性末端。;阅读教材P71第一段的内容。思考回答以下问题:
限制性内切核酸酶的来源及作用特点?切割部位?
;(1)来源:
能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。;思考:限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么?;阅读P71第二段的内容,结合图3-3,思考回答以下问题:
课本中所举例的两种限制酶切割DNA片段后产生的末端有什么不同?
;(4)切割结果:;;大多数限制酶的识别序列由___个核苷酸组成,也有少数限制酶的识别序列由___个、___个或____________的核苷酸组成;(1)和 ; (2)和 ; (3)和 ; (4)和 。; 练习:流感嗜血杆菌的d菌株( Haemophilus influenzae d )中先后分离到3种限制酶,则分别命名为:;[资料2]1967年,科学家们发现了能够将两个DNA片段连接起来的酶,可以用它来修复DNA链的断裂口,并把这种酶叫做DNA连接酶。1970年,科学家们又提取了一种具有更高活性的T4 DNA连接酶。当两个DNA片段的黏性末端彼此相临,而且它们的碱基能够互补配对时,DNA连接酶就能把它们之间的缝隙“缝合”起来(如图)。;阅读教材P72对应内容。思考回答以下问题:
DNA连接酶的作用?种类?不同DNA连接酶的比较?
; 将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,形成重组DNA分子。;;; 有2个不同来源的DNA片段A和B,A片段用限制酶Spe l进行切割,B片段分别用限制酶HindⅢ , XbaⅠ、EcoRⅤ和XhoⅠ进行切割。各限制酶的识别序列和切割位点如下。
(1)哪种限制酶切割B片段产生的DNA片段能与限制酶Spe l切割A片段产生的DNA片段相连接?为什么?; (2)不同的限制酶切割可能产生相同的黏性末端,这在基因工程操作中有什么意义?; (3)画出限制酶XbaⅠ切割B片段产生的DNA片段与限制酶Spe l切割A片段产生的DNA片段相连接后新产生的重组DNA片段;
思考新产生的DNA片段还可以用限制酶Spe l或者限制酶XbaⅠ切割吗?为什么?
;重组DNA分子;[资料3]1973年,美国科学家科恩(S.Cohen)等人从大肠杆菌中提取出了两种质粒,一种含有卡那霉素抗性基因,另一种含有四环素抗性基因。他们将这两种基因分别“切割”
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教师资格证持证人
专注于中小学各科教学多年,曾获青年岗位能手荣誉称号; 教育局评为县级优秀教师; 2013在全省高中思想政治优秀设计评选活动中荣获一等奖; 在全市高中优质课大赛中荣获一等奖; 第十一届全国中青年教师(基教)优质课评选中荣获二等奖; 2017年4月全省中小学教学设计中被评为一等奖2018年被评为市级教学能手
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