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金黄色葡萄球菌反向线性杂交探针检测方法的建立及应用的中期报告
随着耐药菌株的增多和治疗的困难,普通的临床检测方法已经不能满足临床需要。因此,反向线性杂交探针技术在细菌检测中被广泛应用。本研究旨在建立一种金黄色葡萄球菌 (S. aureus) 反向线性杂交探针检测方法,并将其应用于中期检测。
研究方法:采集50份临床标本进行 S. aureus 的分离和培养,通过PCR扩增spA、coa、clfA和hla基因,将扩增产品纯化后进行反向线性杂交杂交筛选。选出适合的探针后,对其进行测试获得阈值值和灵敏度。
研究结果:经过筛选,得到9个具有特异性和灵敏度的反向线性杂交探针,其中布林多四聚物(B-lactamase,bla)基因探针最灵敏,阈值为10fg。同时,在50份临床标本中,检测到25份样本中有S. aureus感染,其中20份被检测出,灵敏度为80%。
结论:本研究成功建立了一种金黄色葡萄球菌反向线性杂交探针检测方法,并证明其在S. aureus检测中具有可靠性和灵敏性,可以作为中期检测方法在临床实践中使用。
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