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淀粉与不同ph淀粉酶溶液混合提取的实验研究 “ph对酶活性的影响”是新课程教材中的一个探索实验。通常，两种浓度值的淀粉和不同浓度的ph值的淀粉酶溶液混合。而牛津版《基础生物学》教材中介绍的方法则简单易行, 效果明显, 值得借鉴。 1 最佳的麦芽糖分解 将浸在不同pH的淀粉酶溶液中圆滤纸片放在淀粉琼脂培养基上, 圆纸片上的酶会催化它周围的淀粉分解。孵育一段时间 (如30mim) 后将碘液倒在培养基上, 如果pH合适, 圆纸块四周便会出现一圈不产生蓝黑色的范围 (清晰区) , 表示该处的淀粉已被完全分解为麦芽糖。酶的活性越高, 被分解的淀粉便越多, 而所观察到的清晰区就越大、越清晰。本实验用的淀粉酶可从绿豆、蚱蜢或鱼的肠中提取。 2 实验过程 2.1 从绿树中提取淀粉酶 将10颗绿豆浸在水中约2d后, 置于碾钵中除去种皮, 加入2mL蒸馏水将绿豆研磨成匀浆, 过滤后获得淀粉酶提取液。 2.2 碘液的制备和分离 实验过程如下: (1) 取1块点样瓷板, 选取其中6个凹穴分别编号为C1～C6, 按下表所列, 向相同编号的凹穴中滴加2滴相应溶液 (图1) 。 (2) 用打孔器打出6块滤纸小圆片, 分别编号为C1～C6, 将滤纸浸在相应凹穴的溶液中;用镊子将浸润的小圆片淀粉琼脂培养基上, 37℃孵育约30min (图2) 。 (3) 将碘液倒入培养皿内, 旋转约1min 后 , 用自来水缓缓地冲去琼脂淀粉培养基上多余的碘液。 (4) 观察培养基表面并量度和比较各清晰区的直径, 记录各区的清晰度 (可用清晰、略浑矇、浑矇和无变化等词表示) 。 2.3 含纯酶提取液和酸性介质的酶提取实验 含处于碱性介质的酶提取液的滤纸片 (C5) 所产生的清晰区 直径最大;含纯酶提取液 (C1) 和处于酸性介质的酶提取液 (C4) 的直径小;而对照实验 (C2、C3、C6) 则观察不到清晰区。这些结果说明淀粉酶在碱性介质中能发挥最大的功能, 而在酸性或中性介质中则活性较低。 3 本研究的初步教训 3.1 课外用情境观察 常规实验中一般是利用3支试管进行实验, 而此实验采用了淀粉琼脂培养基, 用圆形滤纸片浸在不同的介质中, 观察再用碘液检验淀粉被分解的状况。这样给学生以新的情境, 改变了教材中一贯采用的试管进行的相关实验。使学生认识到探究实验和材料选择具有多样性, 这也是创造性思维的基础。 3.2 提高实验难度,促使探究实验 常规实验中淀粉酶是由教师提供的, 本实验中需要学生自己提取酶, 使实验的难度加大, 同时使学生了解探究实验往往是多个实验环节组成的, 而这些环节是密切相关的, 这对于培养学生的生物学科素质具有重要意义。 3.3 对照实验的效果 常规的探究pH对酶活性影响的实验中只设置了3支试管, 实验中实际上缺少了对照实验。而此实验中增加了无酶的酸性介质、无酶的碱性介质及蒸馏水, 这3组空白对照是为了说明酸、碱和中性无酶介质不能分解淀粉, 从而排除无酶介质对实验的干扰, 使实验结果更有说服力, 实验过程更加科学、合理。