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- 2023-10-07 发布于上海
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禾谷镰刀菌木聚糖酶基因的克隆与特征分析以及小麦靶蛋白初步筛选的中期报告
本研究旨在克隆禾谷镰刀菌木聚糖酶基因,并对其进行特征分析,同时对小麦靶蛋白进行初步筛选。
1. 禾谷镰刀菌木聚糖酶基因的克隆
采用PCR方法从禾谷镰刀菌基因组中扩增木聚糖酶基因。结果显示,扩增得到了一段大约1.5kb的DNA序列。对该序列进行测序和比对分析后,发现其与已知的禾谷镰刀菌木聚糖酶基因序列高度相似,成功克隆了该基因。
2. 禾谷镰刀菌木聚糖酶基因的特征分析
对克隆的禾谷镰刀菌木聚糖酶基因进行特征分析,发现其编码一个由761个氨基酸组成的蛋白质,预测的分子量为84.17 kDa。结构分析显示,该蛋白质含有多个保守结构域,包括GH10家族的木聚糖酶酶活性区、家族10的半乳糖酶酶活性区和CBM1纤维素结合结构域等。
3. 小麦靶蛋白初步筛选
选取麦种子中的蛋白提取物作为小麦靶蛋白,然后通过蒸发结晶、SDS和质谱分析等方法进行筛选和鉴定。初步结果显示,共检测到约20个蛋白质与克隆的禾谷镰刀菌木聚糖酶基因编码的蛋白质存在相互作用,进一步验证结果正在进行中。
综上所述,本研究成功克隆了禾谷镰刀菌木聚糖酶基因,并对其进行了特征分析。同时,对小麦靶蛋白进行了初步筛选,为后续的实验奠定了基础。
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