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耐MTX的小鼠NIH3T3细胞内扩增基因的验证的中期报告 这篇中期报告旨在汇报使用 耐MTX的小鼠NIH3T3细胞（MTX-R NIH3T3）扩增基因的实验进展情况。 实验设计 我们使用MTX-R NIH3T3细胞系，该细胞系已经经过长期MTX筛选并稳定地表达了耐药的增殖性。我们选择了两个目标基因进行扩增验证，使用了感兴趣的引物对MTX-R NIH3T3细胞进行PCR扩增。引物的选择基于基因的启动子区域和蛋白质编码序列。 结果 我们成功地扩增并验证了其中一个基因的存在。该基因的PCR产物大小与预期的大小相一致。但是，我们在扩增第二个目标基因时遇到了困难。在多次尝试后，我们无法获得与预期大小相同的PCR产物。我们怀疑是由于引物与目标基因之间的序列不匹配导致了扩增失败。我们将尝试设计新的引物以获得PCR产物。 讨论 我们期望能够使用MTX-R NIH3T3细胞系来扩增耐MTX的基因。我们取得了初步成功，并成功验证了一个基因的存在。然而，我们遇到了部分失误，其中一个基因证实扩增困难。我们将继续尝试新的引物以获得预期大小的PCR产物并继续流程的下一步，包括测序、表达和功能研究等。 结论 到目前为止，我们已经成功地扩增并验证了一个目标基因的存在，而第二个目标基因由于引物设计上的问题尚未得到扩增确认。我们将尝试新的引物来解决这个问题。