大蒜中超氧化物歧化酶提取与纯化.docxVIP

广东石油化工学院 实验报告 生物技术系 专业生物技术班别学号_姓名同组人实验课程大蒜中超氧化物歧化酶提取与纯化实验日期2011-6-13至2011-6-21成绩大蒜中超氧化物歧化酶提取与纯化 一、实验目的： 学习并掌握大蒜SOD提取与纯化的方法及原理。 学习并掌握DEAE-纤维素离子交换层析分离纯化蛋白质的操作方法。 学习并掌握SDS法测定蛋白质分子量的方法。 学习并掌握邻苯三酚自氧化法测定SOD酶活的方法。 熟悉考马斯亮蓝测定蛋白含量的实验原理和方法。 二、实验原理： 超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD5)广泛存在于动植物及微生物体内，可催化细胞内超氧负离子6的歧化反应，使。2-转化为HQ和q。因此，SOD是一种具有抗脂质氧化、抗衰老、抗辐射和消炎作用的药用酶及功能性酶，在医药、食品、化妆品等领域有着广阔的应用前景。 SOD是一种亲水性的酸性酶蛋白，在酶分子上共价连结金属辅基，按照其结合的金属离子，主要可分为Fe-SOD、Mn-SOD和Cu/Zn-SOD3种。Cu/Zn-SOD是分布最广而且是最重要的SOD，主要存在于真核细胞的细胞浆内，分子量约为32KD，一般由两个亚基组成。SOD对热、pH以及某些理化性质有很强的稳定性，即使温度达到60^，经短时处理酶活几乎无损失；同时，酶活性不受乙醇和氯仿影响，但Cu/Zn-SOD对氤化物及过氧化氢均敏感。SOD