融合多角体的家蚕膜蛋白BmCPH43的表达纯化及结晶研究的中期报告.docxVIP

融合多角体的家蚕膜蛋白BmCPH43的表达纯化及结晶研究的中期报告 本团队正在研究一种融合多角体的家蚕膜蛋白BmCPH43，该蛋白质在家蚕的吐丝腺中高度表达，并具有良好的丝蛋白纤维形成能力。我们旨在研究该蛋白质在丝蛋白纤维形成过程中的作用机制以及其在生产具有纤维素质感、柔顺、亮泽的丝绸的应用前景。 在研究过程中，我们成功地对BmCPH43进行了表达和纯化，并进行了初步的物化性质表征。具体地，我们采用冰芯钻取法从家蚕吐丝腺中提取了BmCPH43，并利用His-tag柱层析技术对其进行了纯化，最终得到了纯度高达97%的BmCPH43。通过SDS和Western blot的检测，我们证实了目标蛋白的表达和纯化。此外，我们还利用相关技术对其进行了UV-VIS吸光度测定、圆二色光谱测定、动态光散射等物化性质表征，初步探明了其溶液构象。 随后，我们将目标蛋白进行了结晶筛选。经过许多反复筛选条件的探索，我们终于在一种含有20% PEG 3350和0.2M钾钠磷酸的缓冲液中得到了适合结晶的单晶体。目前我们正在进行结晶品质和X射线晶体学数据采集方面的优化和进一步的探究。 本研究将为深入研究该蛋白质在丝蛋白纤维形成中的作用机制、开发新型丝绸材料和改良传统丝绸生产工艺等方面提供重要的实验依据和理论基础。