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- 2023-10-09 发布于天津
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实验九、小麦萌发前后淀粉酶活力的比较一、目的
.学习分光光度计的原理和使用方法。
学习测定淀粉酶活力的方法。
了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化。
二、原理
种子中贮藏的碳水化合物主要以淀粉的形式存在。淀粉酶能使淀粉分解为麦芽糖。
(CHO)n+HOnCH61052122211
麦芽糖有还原性,能使3,5-二硝基水杨酸还原成棕色的3-氨基5-硝基水扬酸。后者可用分光光度计法测定。
休眠种子的淀粉酶活力很弱,种子吸胀萌动后,酶活力逐渐增强,并随着发芽天数的增长而增加。
本实验观察小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化。
三、器材
25毫升刻度试管。
吸管。
乳体。
离心机和离心管。
.分光光度计。
.恒温水浴。
7、容量瓶50ml
8、电磁炉四、试剂
0.1%标准麦芽糖溶液20毫升:精确称量100毫克麦芽糖,用少量水溶解后,移入100ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度。
pH6.9,0.02摩尔/L磷酸缓冲液100毫升
1%淀粉溶液100毫升:1克可溶性淀粉溶于100毫升0.02摩尔/L磷酸缓冲液,其中含有0.006摩尔/L氯化钠。
1%3,5-二硝基水杨酸试剂:1g3,5-二硝基水杨酸溶于20毫升2摩尔/L的氢氧化钠溶液和50毫升水中;再加人30克酒石酸钾钠,定客至100毫升。若溶液混浊,可过滤。
1%氯化钠溶液300毫升
海砂5克五、操作步骤
种子发芽:(如果是绿豆芽,则只需要24就可以)
小
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