生理实验报告6.docVIP

生命科学院生理实验101140003 操哲3A 操哲 车烨 刘畅 12.10.9 实验六 神经肌肉接点的兴奋传递与阻滞 骨骼肌电兴奋与收缩的时相关系及电活动与收缩的关系 101140003 操哲 实验目的 学习同时记录骨骼肌电兴奋与机械收缩的方法 观察并掌握骨骼肌电兴奋与收缩的时相关系 学习测定骨骼肌终板电位的方法并观察其波形 了解突触传递的的特性 理解肌电图的原理，夯实肌电图描记方法并学习肌电图分析方法 对比分析掌握甘油、琥珀酰胆碱对神经-肌肉标本双向动作电位、肌电图及机械收缩的影响 实验原理 神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋。如果在离体神经干的一端施加刺激，从另一端引导传来的兴奋冲动，可以记录出双相动作电位，假如在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损坏，阻断其兴奋传导能力，这时记录出的动作电位就成为单相动作电位。神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的，而复合动作电位的幅值在一定刺激强度下随刺激强度的增加而增大 肌电图是骨骼肌在收缩前的电兴奋活动，经过引导、放大、记录而成的图形。用于引导肌电的电极有两类：针电极（包括普通针电极、埋藏电极、微电极）和表面电极。本实验继续使用表面电极，表面电极根据容积导体原理设计，即肌肉收缩时，动作电位可以从肌纤维组织液反映到皮肤表面 表面电极为直径1cm的盘状电极，由导电橡胶、氯化银等材料制成，固定在所测肌肉皮肤表面，可引导出骨骼肌较多运动单位的动作电位，以研究动物体活动时整块肌肉的状态。通过表面电极采集肌电，因其无创性而易于接受，故而广泛应用于临床医学、生理学、生物工程学、心理学及运动体育科学等众多领域 骨骼肌受到刺激时先发生兴奋，随后才发生收缩反应，同时记录骨骼肌的电变化和收缩过程，即可观察到二者之间关系 箭毒： 从箭毒蛙中提取出的，有效成分为d-管箭毒碱的一种神经毒素。其可以阻断脊椎动物的神经肌肉的接点作用而使骨骼肌松弛，但此时肌肉本身并不受影响。据认为d-管箭毒碱与乙酰胆碱发生竞争性的颉颃而抑制兴奋传导的，动物中毒死亡是基于呼吸肌的麻痹。其对交感神经肌的突触也有阻断作用，相反地脊髓的反射兴奋却可因此药而增强。对昆虫等无脊椎动物的神经节或神经肌肉接点无效 甘油：甘油可以破坏肌管系统，导致即使肌细胞兴奋也无法收缩 实验对象与器材 实验对象： 1只蟾蜍/组 实验试剂： 任氏液、琥珀酰胆碱、甘油 实验设备： 桥式前置、张力感受器、刺激电极、棉纤维电极、手术器械、铁架台、万向轮、细线等 实验方法与步骤 离体神经肌肉标本制备 夹握好蟾蜍后，对其进行双毁髓处死，剖开蟾蜍，于脊柱骨由上2-3cm处剪开，剥制后肢标本，将蟾蜍皮及内脏等一并清理至废液缸 一手捏住耻端，另一手用手术镊在腓肠肌跟腱下面穿线，并用结线扎紧 剪断跟腱，提起结线，游离腓肠肌 实验装置搭设 将结线一端通过双凹夹与张力感受器连接，调整铁架台位置使感受器灵敏度适当 于腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间找到坐骨神经，用浸湿过组织液的双针形露丝刺激电极及引导电极导线挑出，用试管夹固定电极，调整电极位置使电极不触碰肌肉 另一试管夹夹住棉刺激电极，先让电极前端棉花浸润任氏液，再将，棉花覆盖于腓肠肌表面 设置参数 打开chart7软件，设置扫描频率为4k/s 打开stimulator和sampling窗口，设定参数如下 测定 对样本施加刺激，在channel 1记录单收缩谱图，channel 2记录肌电图，channel 3记录双向动作电位，测定空白对照组 于腓肠肌近心端注射琥珀酰胆碱，并滴加少量到腓肠肌表面，重新测定单收缩、肌电图、双向动作电位 换蟾蜍另外一条腿做神经-肌肉标本，先测定空白对照组，再于腓肠肌两端注射甘油，并滴加少量到腓肠肌表面，重新测定 实验结果与分析 　 神经干 双向动作电位 肌电图 机械收缩 琥珀酰胆碱对照组 有 有 有 琥珀酰胆碱实验组 有 无 无 甘油对照组 有 有 有 甘油实验组 有 有 无 　 神经干 双向动作电位 肌电图 机械收缩 琥珀酰胆碱对照组 琥珀酰胆碱实验组 甘油对照组 甘油实验组 琥珀酰胆碱实验组组合图： 甘油实验组组合图： 骨骼肌兴奋收缩时相图: 实验讨论 棉纤维电极前端棉花使用前应先完全浸润任氏液，并且棉花前端应注意剪细，本次试验前三组由于电极制作不佳，肌电图全部显示为单峰 本次试验所用蟾蜍解剖后肌肉有所萎缩，刺激反应时所需电流较高，到实验末段，刺激电流达到最大值肌肉也无明显反应，一方面可能未及时用任氏液润湿标本，一方面也有可能蟾蜍长时间置于蛇皮袋中对其肌肉反应有影响 注射、覆加棉花纤维电极、施加刺激电流等操作都应注意勿触碰到牵拉腓肠肌的棉线，防止轻微的影响破坏实验记录图 本次试验甘油较为粘稠，吸取和注射都应谨慎；另外吸取甘油及