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水牛BMP-15与GDF-9基因5调控序列的克隆与分析的中期报告
该项目的研究目的是克隆和分析水牛BMP-15和GDF-9基因5调控序列。在前期的实验中,我们已经成功地克隆了水牛BMP-15和GDF-9基因的5调控序列,并进行了初步的分析。
在克隆过程中,我们首先利用PCR方法从水牛卵巢组织中扩增出了带有BMP-15和GDF-9基因5端序列的DNA片段,并将其克隆到pGL3-Basic质粒载体上。接下来,我们对克隆得到的质粒进行了序列测定,确定了其具体序列信息。
在分析方面,我们主要从以下三个方面对BMP-15和GDF-9基因的5调控序列进行了初步的分析:
1. 启动子预测:我们利用软件程序对克隆得到的序列进行分析,预测出其中可能的启动子序列,并对这些序列进行了进一步的验证和分析。
2. 转录因子结合位点鉴定:我们进一步分析了序列中可能的转录因子结合位点,并利用电泳迁移实验验证了其中一些位点的功能。
3. 驱动基因表达实验:最后,我们对包含不同长度的BMP-15和GDF-9基因5调控序列的质粒进行了转染和荧光素酶活性分析,观察了这些序列对驱动目标基因表达的影响。
总的来说,我们的实验取得了比较明显的进展,初步建立了水牛BMP-15和GDF-9基因5调控序列的分析体系。接下来我们将继续深入探究这些序列的功能和调控机制,为更好地理解水牛生殖生物学及其品种改良提供基础数据。
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