锁阳水提液对d-半乳糖致衰小鼠肝细胞线粒体能量代谢的影响.docxVIP

锁阳水提液对d-半乳糖致衰小鼠肝细胞线粒体能量代谢的影响 锁阳又名不老药、铁锤，具有消除自由基、抗血小板聚集、调节身体免疫功能、提高细胞代谢等功能。研究表明, 自由基对线粒体损伤及对衰老的发展过程起到促进作用。线粒体功能异常与衰老的发展过程密切相关。有关锁阳对线粒体能量代谢影响方面的研究报道很少。本实验研究对锁阳水提液延缓衰老的效应及其作用机制进行初步探讨。 1 材料和方法 1.1 合并滤液浓缩 锁阳常规100目粉碎经蒸馏水浸泡12 h, 置于超声波粉碎机提取, 合并滤液减压浓缩。D-半乳糖由上海试剂二厂生产, MDA、考马斯亮蓝蛋白定量试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供, NADH、ATP均由AMRESCO公司提供, 其他试剂均为分析纯。 1.2 仪器 细胞超声粉碎机、723光栅分光光度计、电动玻璃匀浆机、全自动高速冷冻离心机、透射电镜、超薄切片机、电子天平等。 1.3 模型分组及给药 30只2～3月龄昆明种小鼠, 雌雄各半, 体重 (20±2) g, 购于佳木斯大学实验动物中心。标准环境下饲养, 常温、常湿、自由进食饮水。随机分成青年组、衰老模型组 (衰老组) 和模型给锁阳水提液组 (给药组) , 每组10只。模型组和给药组按参考文献制造衰老模型, 即颈背部皮下注射D-gal (100 mg·kg-1·d-1) , 对照组颈背部皮下注射等量生理盐水, 连续30 d;给药组灌