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南方鲇Stra8分子克隆、表达和转录调控的初步研究的中期报告
本研究旨在分离和克隆南方鲇(Clarias fuscus)的Stra8基因,进一步探究该基因在南方鲇生殖细胞发育中的调控作用。
为了克隆Stra8基因,我们首先使用RT-PCR技术从南方鲇的卵巢和睾丸组织中获得了候选序列。经过序列比对和分析,我们确定了一段长度为1137bp的序列,该序列包含了完整的Stra8基因编码序列。
接下来,我们将该基因克隆到表达载体中,并转染到鱼类细胞系中(DF-1细胞)。Western blotting结果表明,经过诱导表达后,Stra8蛋白质被成功表达。
为了研究Stra8基因的转录调控,我们将该基因的启动子区域克隆到荧光素酶报告载体pGL3-Basic中,并转染到DF-1细胞中。荧光素酶活性检测发现,该启动子区域能够显著促进荧光素酶的表达,说明该区域可能包含了一些转录调控元件。接下来,我们将继续进行该启动子区域的功能分析。
综上,我们成功地克隆了南方鲇的Stra8基因,表明该基因在南方鲇生殖发育中发挥重要的作用。我们正在进一步研究该基因的转录调控机制,以期更好地了解其生物学作用。
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