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查尔酮异构酶简介： Ø 查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)是第1个被认识的黄酮类化合 物合成相关酶，也是黄酮代谢途径中的关键酶之一。查尔酮合酶( CHS)和查尔酮异构酶一起构成了黄酮类化合物生物合成的限速酶[1]。 Ø 作用过程： 由一个香豆酰辅酶A和三个丙二酰辅酶A在CHS的作用下 生成查尔酮。查尔酮再经过CHI的作用形成二氢黄酮。二氢黄酮再在 各种酶的催化下转化为其它各种颜色类型的黄烷酮化合物[2]。 Ø 查尔酮异构酶广泛存在于多种植物中，涉及了苯丙氨酸代谢途径中各 种具有防御性产物的生物合成，在植物的抗菌机制、抗胁迫、细胞的 发育和分化、色素的积累和外源基因的表达等方面起着重要的作用。 l研究发现 CHI隶属超基因家族，通常由 一到多个基因编码。已经识别的 典型 CHI基因通常包括 4个外显子和3个内含子，在不同种类的植物相似 程度较高。在矮牵牛中已经发现的两类CHI基因具有不同的时空表达模式， CHIA在所有花组织以及 UV处理的幼苗中表达，而 CHIB仅在未成熟的花 药中表达。在玉米中也发现 3个编码CHI 的基因，其中一个编码 24.3KDa的基因(ZmCHI Ⅰ)，与矮牵牛 CHIA和 CHIB的同源性分别达到 55%和58%[4]。 l按查尔酮异构酶作用底物不同，可将其基因分为2类。一类存在于非豆科 植物，其编码的CHI仅能催化6’-羟基查尔酮转化为5-羟基黄烷酮(Tape Ⅰ)；另一类存在于豆科植物，其编码的CHI能催化6’-羟基查尔酮和6’-脱 氧查尔酮转化为相应的5-羟基黄烷酮和5-脱氧黄烷酮(Tape Ⅱ ) [3]。 一、 CHI的基因序列研究: 文献[2] 星号表示各活性位点;圆圈表示形成活性部位的核心区域:三角符号表示可能涉 及到的与底物特异性结合相关的位点[4]。 植物的 型和 型CHI 氨基酸多序列比对 Ⅰ Ⅱ 由表1可见,不同植物CHI 基因全长、开放阅读框碱 基数及其所编码的CHIB 氨基酸残基数相差较小, 且编码区的起始密码子均 为ATG,而终止密码子则 不一致,洋葱和豌豆的是 TGA,番茄和茶的是TAA 。 同时,不同植物CHI的分子 量、等电点、摩尔消光系 数、酸性氨基酸比例、碱 性氨基酸比例、带电氨基 酸比例、极性氨基酸比例、 疏水性氨基酸比例等理化 指标均表现出一定的差异 ,这表明CHI基因可能存在 一定的物种特异性和生化 多态性;含量最丰富的氨 基酸也不完全相同,但至 少都含有Lys,说明Lys在 CHI的催化反应中起着重 要作用[3]。 文献[3]