实验项目：黄酮提取课件.pptxVIP

实验项目： 木芙蓉花中有效成份提取与性能研究 v1．了解植物中有效成份的药用价值。 v2．掌握植物中有效成份的提取及其测定方法。 v3．掌握抑制亚硝化反应的操作与方法。 一、目的与要求 v黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环(A-与B -环)通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化 合物，其基本母核为2-苯基色原酮。是一大类以 苯色酮环为基础的酚类化合物。植物中由苯丙氨 酸产生的肉桂酰辅酶A，经碳链延长环化生成的 查耳酮，再衍生成的各种α-苯基衍生物。 二、实验原理与相关知识 植物单宁(Vegetable tannins)，又称植物多酚(Plant Polyphenol)为多羟基苯， 如苯二酚、苯三酚等，是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物。在维管 植物中的含量仅次于纤维素、半纤维素和木质素，广泛存在于植物的皮、根、 叶、果中，含量可达20%。植物单宁是植物的次生代谢产物，属于天然有机 化合物。常是植物及微生物中产生的酚类次生代谢产物。具有抗氧化性、抗 肿瘤、抗动脉硬化、防冠心病与中风等心脑血管病以及抗菌等多种生理功能， 是自然界和人类的“健康卫士” 。2l世纪随着抗氧化剂理论及研究工作的深入， 以及消费者对食品安全性意识的提高，天然抗氧化剂的应用越来越受到人们 的重视，回归大自然已是目前一个大趋势。木芙蓉(Hibiscus mutabilis L. ) 为锦葵科植物，又名拒霜花、木莲、醉芙蓉，为落叶灌木或小乔木。其花大 色艳，花色一日三变，在寒凉的深秋傲霜怒放，观赏价值极佳。其花、叶、 根富含生化药物成分，是极优良的中药材。中医认为，木芙蓉性平味辛，有 清热、凉血、解毒、消肿、排毒之功效，适用于肺热咳嗽、月经过多、白带 过多、痈疽肿毒、疔疮、水火烫伤等疾病。 《本草纲目》言其“治一切大小 痈疽，肿毒恶疮，消肿，排脓，止痛”。木芙蓉花、叶中含有多酚、黄酮类 化合物。 二、实验原理与相关知识 v1.测定总黄酮的原理: v在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合 物先与亚硝酸钠发生氧化还原反应， 再加硝酸铝络 合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生 成 2-羟基查耳酮而显红橙色,在510 nm波长处有吸 收峰且符合定量分析的比尔定律,一般与芦丁标准系 列比较定量(它的显色原理发生在黄酮醇类成分邻 位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二 酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时是不显色的 )。 二、实验原理与相关知识 v 2.多酚测定原理: v总多酚的测定采用Folin-Ciocalteu法测定总多酚 含量，其反应原理为酚类化合物在碱性条件下可 以将钨钼酸还原，生成蓝色的化合物，颜色的深 浅与酚类化合物含量呈正相关，在波长760 nm左 右有最大吸收，一般与没食子酸标准系列比较定 量 。 二、实验原理与相关知识 v3.总黄酮对亚硝酸钠清除率的测定 v亚硝酸钠在弱酸性条件下，与对氨基苯磺酸重氮 化，然后再与盐酸萘乙二胺偶合生成红色化合物， 用分光光度计测出该化合物的吸光度，就可知道 反应液中亚硝酸钠含量多少。据此可以通过测定 相同条件下亚硝酸钠含量的变化反映总黄酮清除 能力的强弱，亚硝酸钠含量少，总黄酮清除能力 就强，反之则弱。 二、实验原理与相关知识 v (一)实验室提供下列仪器和试剂 v1、仪器： v电子分析天平；粉碎机；数显恒温水浴锅；三用紫外仪； 真空泵；分光光度计；电热套；比色管；常用玻璃仪器。 v2、试剂： v木芙蓉花采自湖北师范学院校区；芦丁(上海展云化工有 限公司)；对氨基苯磺酸(分析纯)；柠檬酸(分析纯)； 磷酸氢二钠(分析纯)；盐酸萘乙二胺(分析纯)；二甲 胺(分析纯)； 1-萘胺(分析纯)；钨酸钠(分析纯)； 钼酸钠(分析纯)；没食子酸(分析纯)；(分析纯)； 乙醇(分析纯)； A1(NO3)3 (分析纯)；盐酸(分析纯)； NaOH (分析纯)；浓H2SO4 (分析纯)；磷酸(分析纯 )。 三、仪器与试剂 v一、 样品的处理及提取 v1. 处理：新鲜木芙蓉花水洗后，于60℃烘干，粉 碎机粉碎，过筛备用。 v2. 提取：精密称取干燥、粉碎的木芙蓉花粉末 1.0000 g置于锥形瓶中，加入60 %乙醇溶液30mL ，于60℃浸提2 h，滤去残渣，残渣洗涤2-3次， 定容至100 mL ，即得提取液。 四、 实验步骤 v(