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克氏双糖铁琼脂 克氏双糖铁琼脂 一、克氏双糖铁琼脂的用途和原理: 克氏双糖铁琼脂用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖，及产生硫化氢的生化反应。克氏双糖铁琼脂原理:蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素、矿物质;乳糖、葡萄糖为可发酵糖类，其产酸时通过酚红指示剂测出，酸性呈黄色，碱性呈红色;硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢，与铁盐生成黑色硫化铁;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。各种革兰氏阳性杆菌也可生长及产生硫化氢。 二、克氏双糖铁琼脂配方(每升): 蛋白胨 20g 牛肉膏粉 3g 酵母膏粉 3g 乳糖 10g 葡萄糖 1g 氯化钠 5g 柠檬酸铁铵 0.5g 硫代硫酸钠 0.5g 琼脂 12g 酚红 0.025g 最终pH 7.4?0.2 三、克氏双糖铁琼脂使用方法: 1、称取克氏双糖铁琼脂55g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管(装量宜多些)，121?高压灭菌15min，制成高层斜面，待冷却后，备用。 2、挑取待检菌的新鲜培养物，穿刺接种混合克氏双糖铁琼脂斜面。接种时先在斜面划线，然后再穿刺底层，反之亦可。(应注意不要在分离平板上菌落密集的部位挑取可疑菌落，而应在菌落稀疏部位挑取单个菌落。) 3、将试管放入培养箱内36?1?培养18—24h。 4、观察结果。观察斜面与底层的反应情况。 四、质量控制: