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m法检测细胞增殖性的研究 目前，有很多方法可以检测细胞活性，但都有不足之处。例如，相位（3dtdt、125iudr）和混合方法具有高度灵敏性和良好的稳定性，但有许多步骤需要特殊设备。最大的问题是辐射，mtt法具有高灵敏性、稳定性好、操作简单的特点。在这项工作中，我们讨论了mtt还原法在测定细胞扩散活动中的作用。 1 mtt药物处理 1.1 材料与仪器 MTT ( 四甲基偶氮唑盐) 由上海生工生物工程技术服务有限公司提供, DMSO (二甲基亚砜) 由上海生工提供;倒置显微镜 (重庆光学仪器厂 XSZ-D2) ;加样枪 (加拿大Acurapette) ;酶标仪 (日本BIO-RAD) 。 1.2 方法 1.2.1 接种、培养细胞 使用与酶标仪匹配的96孔培养板, 测定细胞增殖每孔体积200 μl 含约2 000个细胞, 应根据所用的细胞类型、增殖速度进行调节, 注意设置3个重复孔和无细胞培养基对照, 37 ℃培养细胞至合适的时间, 然后给予特定的药物或物理因素刺激。 1.2.2 加MTT 药物处理结束后, 一般每孔200 μl培养基加入20 μl MTT (5 mg/ml) , 37 ℃培养箱内继续孵育4 h, 血清浓度尽量不高于5%, 最好在加MTT (5 mg/ml) 前换成无血清的培养基。 1.2.3 呈色、比色 如果是贴壁细胞, 小心吸出培养上清液, 每孔加入100 μl