肿瘤标记物1课件.pptxVIP

皖南医学院弋矶山医院 王荣鑫 2007年 3月 肿瘤标志物测定的临床应用 讲述 内容 一. 概述 二. 肿瘤标志物的分类及临床应用 三. 肿瘤标志物的临床应用价值 四. 肿瘤标志物合理应用及注意事项 一.概述 癌症对人类健康和生命的威胁很大。 它和心血管疾患一起，已成为医学上的两 大难关。全世界52亿人口中，每年约有700 万人新患癌症，每年约有500多万人死于癌 症， 几乎每6秒钟就有一名癌症患者死亡。 近年来，我国癌症的发病率呈上升趋 势，恶性肿瘤居城市人口死因的首位。 据卫生部统计，我国每年有106万恶性 肿瘤新的患者，良性肿瘤患者106.7万,合 计212.7万,发病率为1.65‰ 。芜湖市有三 区三县，人口220万，按上面的发病率计算， 每年有3630人患肿瘤。肿瘤的防治是摆在 芜湖市全体医务人员面前的艰巨任务。 早期诊断肿瘤有二大类方法： 一 是医学影像学方法； 二 是检验诊断学、核医学方法。这里 讨论的肿瘤标志物的测定，就属于这 一类。 随着分子生物学技术的发展，从分子 水平发现基因结构或功能的改变以及具有 一定生物学功能的基因产物的非正常表达 均与肿瘤的发生、发展亦有密切关系，所 以癌基因、抑癌基因及其产物也属TM之列。 为了与前面讲过的血清或其他体液中TM区 别，前面一类称为体液TM。后面一类称为 细胞TM。没有说明哪一类的TM，就指体液 TM。 理想的肿瘤标志物认为应具有下列 特点： (1)敏感性高，能早期测出所有肿瘤 患者； (2)特异性好，鉴别肿瘤和非肿瘤患 者应100％准确； (3)有器官特异性，能对 肿瘤定位； (4)血清中浓度与瘤体大小、临 床分期相关，可用以判断预后； (5)半衰期 短，能反映肿瘤的动态变化，监测治疗效 果、复发和转移； (6)测定方法精密度、准 确性高，操作简便，试剂盒价廉。但至今 为止，尚无一种理想的TM。 在检验诊断学、核医学方法中。肿瘤标志物的测 定广泛采用标记免疫学分析法。具体的内容有：放射 免疫分析、酶免疫分析、化学发光免疫分析、时间分 辨荧光免疫分析等方法。放射免疫分析是应用较早、 成本低、临床应用价值高的免疫分析法。1978年。我 们医院成功开展了放射免疫火箭电泳自显影测定甲胎 蛋白 (AFP) 。同一年，我们与学院生化教研室一起， 举行了安徽省放射免疫火箭电泳自显影学习班。 放射免疫基本原理 放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)是竞争性体外 放射分析建立最早、用最广泛的这一类技术。其原理： Ag+Ab Ag ·Ab + *Ag *Ag ·Ab 化学发光免疫分析的基本原理 化学发光免疫分析(chemiluminescence immu-noassay,CLIA) 与 RIA的基本原理一样，包括免疫结合反应(抗原抗体反应)和产生信号 的标记物(放射性核素与光子)两部分组成。与前者不同的是所用的标 记物与检测信号不同。 CLIA是利用化学反应中释放大量自由能，产 生激发态中间体，当其回到稳定的基态时发射出光子(hν)，用发光 信号测量仪对所发出的光量子进行定量测量。 CLIA将发光物质 (或触发产生 发光的物质) 直接标记在抗原 (化学 发光免疫分析) 或抗体 (免疫化学发 光分析) ，其发光的基本过程为： 激发发光剂→电子激发态中间体→基 态+hν (光量子) 化学发光分析与放射免疫分析相比有如下 优越性： 1、灵敏度高 由于免疫分析材料或生物样本中几乎没有产生 化学发光现象，背景噪声低，检测的灵敏度可达10- 18mol/L。 2、稳定性好 吖啶酯直接化学发光，对pH和温度相对不敏感， 仪器的工作性能良好。采用计算机技术，测定时间精 确控制在μs级水平，保证了检测结果的稳定性和重 复性。 3、反应快速，发光过程1s钟完成。 由于标记物包被在极细 (1~2μm) 的磁 性颗粒上，表面积极大地增加，反应在分散 悬浮液的状态下进行，温度恒定在37℃，反 应过程快速。 4、结合与游离体分离采用磁性分离技术， 方便、简单、快速、彻底。 5、试剂稳定，无放射性，无毒性。 时间分辨荧光免疫分析 时间分辨荧光免疫分析(time-resolved flu- oroimmunoassay,TrFIA )是 80 年代初的元素 有Eu3+ (铕)， Tb3+ (铽)和Sm3+ (钐) ,而 Eu3+ 是标记抗原抗体应用最多的元素。它是 Pettersson等和Eskola等创立的一种非放射性标 记免疫分析技术。它与传统的荧光素标记完全 不同，它以镧系元素为标记物。 TrFIA操作方便，标记物稳定性好，制 备简单并可长期保存，加之标准曲线范围 广，仪器自动化程度高等优点，深受生物 医学工