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;第一章 血液一般检验;第一节 血液标本采集与处理;;;;;;;;(一)皮肤采血法;(一)皮肤采血法;;;(二)静脉采血法;;;;;;(三)动脉采血法;;;;;预处理:
血常规检测:室温存放
血浆:可通过离心抗凝血获得血浆;
血清:对未含促凝剂或分离胶采血管的血液标本置于37℃孵育,
待血液完全凝固后离心分离血清;
含促凝剂或分离胶采血管的血液标本可直接离心分离血清;
对于需要特定细胞的实验,应根据要求采用不同的细胞分离液
或分离技术分离细胞,同时尽量避免混入其他细胞。
;;四、血液标本运送、保存与处理;(一)检验申请;第二节 血涂片的制备与染色;第二节 血涂片的制备与染色;第二节 血涂片的制备与染色;
引起血涂片分布不均的主要原因:
推片边缘不整齐
用力不均匀
载片不清洁;二、血涂片染色
(一)瑞氏染色法 (Wrights stain )
1.瑞氏染料(复合染料)
酸性染料伊红 (E-)
碱性染料亚甲蓝 (M+,又名美蓝)
美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料 (即天青) ,
甲醇的作用:
①溶解美蓝和伊红,解离为 M+和E- ;
②脱水作用,固定细胞形态,增强染色效果;第二节 血涂片的制备与染色;第二节 血涂片的制备与染色; 3.pH值的影响 细胞各种成分均属蛋白质(两性电解质);第二节 血涂片的制备与染色;第三节 白细胞显微镜检查;血液;;3.器材;Neubauer计数盘(牛鲍氏计数盘);; 0.38ml稀释液 混匀
20ul血液 充池、静置 镜下计数、计算
;计数:用低倍镜计数四个大方格内的白细胞数(N)。
计算:WBC/L=N/4 ×10 ×106 ×20
=N/20 X 109/L
;;
例:校正前白细胞数为12×109/L,在作白细胞分类计数时计数100个白细胞的同时数得的有核红细胞数为40个,则
校正后白细胞数/L = 12×109/L ×
= 8.6×109/L;4.经验控制
以血涂片中所见白细胞的多少粗略核对白细胞计数结果有无大的误差。
表 ??涂片白细胞密度与白细胞总数的关系;(三)方法学评价
白细胞计数的方法学评价;;二、白细胞分类计数;; 最佳观察部位:
体 尾 交 界 处;2.报告方式
(1)白细胞分类计数结果:以各种白细胞所占的比值或百分率表示,
或者根据白细胞总数计算出各种白细胞的绝对值报告。
(2)幼稚或异常白细胞:发现幼稚或异常白细胞,应计算在白细胞
分类比值或百分率中。
(3)有核红细胞:血涂片中如见到有核红细胞,应逐个计数,但
不列入白细胞总数之内,而是报告分类计数100个白细胞的同时
见到的有核红细胞个数。
(4)寄生虫:如发现疟原虫等应报告。
(5)红细胞、血小板的形态:如有异常改变应报告。 ;;(三)参考区间
白细胞分类计数参考区间(成人);(四)临床意义;;;;;;;(1)单核细胞增多 正常儿童单核细胞较成人稍高
病理性增多见于:
①某些感染:如亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、急性感染的恢复期、
活动性肺结核等。
②某些血液病:单核细胞性白血病、粒缺恢复期、恶性组织细胞病、淋巴瘤
及骨髓增生异常综合征(MDS)等。
(2)单核细胞减少 意义不大。;;;;;;;;都是什么细胞?;;三、白细胞形态检查
(二)外周血异常白细胞形态;即中性粒细胞体积大小悬殊。
可能是在内毒素等因素作用下
骨髓内幼稚中性粒细胞发生
不规则分裂的结果。
常见于一些病程较长的化脓性感染。 ;中性粒细胞胞质中出现的粗大、大小不等、分布
不均匀的紫黑色或深紫褐色颗粒,称中毒颗粒。
可能因特殊颗粒生成受阻或发生颗粒变性所致。
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