小麦D基因组抗病基因类似序列RGA-SSR标记的开发及其应用的中期报告.docxVIP

小麦D基因组抗病基因类似序列RGA-SSR标记的开发及其应用的中期报告 该研究旨在开发小麦D基因组抗病基因（R-gene）的类似序列，并利用简单序列重复（SSR）标记进行标记化，以便进行分子标记辅助选择。截至目前，已完成了中期报告的工作，具体如下： 1. 基因组DNA提取：从4个小麦品种（Triticum aestivum L.）和一个野生品种（Triticum boeoticum Boiss.）中提取了基因组DNA。使用PCR对DNA进行品质检测，所有样本的DNA品质良好。 2. R-gene类似序列筛选：通过对小麦D基因组进行BLAST分析，从小麦D基因组数据库中筛选出了40个类似于已知R-gene的序列。这些序列将被进一步验证其抗病性。 3. SSR标记开发：利用PCR技术验证了上述40个序列是否包含简单序列重复（SSR），发现其中32个序列包含SSR。接下来，将使用特异性引物将这些SSR序列扩增，并进行测序以鉴定其多态性。 4. SSR标记验证：鉴定30个包含SSR的序列和3个控制序列的多态性，发现这些序列在小麦品种之间具有良好的多态性。 5. 小麦抗性分析：将44个序列设计为RGA-SSR标记，对小麦品种进行PCR扩增，并通过ELISA鉴定其抗病性。结果表明，其中5个标记在多个小麦品种中具有高度抗病性。 总之，在该研究中，我们成功地开发了小麦D基因组抗病基因的类似序列，并使用SSR标记进行标记化。通过验证这些SSR标记的多态性和小麦的抗病性，我们将为小麦分子标记辅助选择提供有益的信息。