细胞衰老相关microRNA的鉴定和功能研究的中期报告.docxVIP

细胞衰老相关microRNA的鉴定和功能研究的中期报告 背景介绍： 随着人口老龄化的日益加剧，老年病的防治成为社会关注的焦点。细胞衰老是老年病的重要原因之一，近年来越来越多的研究表明microRNA在细胞衰老过程中发挥着重要的调控作用。 目的： 本研究旨在鉴定与细胞衰老相关的microRNA，并研究其具体功能，为老年病的防治提供新的治疗方法。 方法： 1.细胞培养和处理：以老年人外周血中的CD8+ T细胞为研究对象，采用体外培养方法培养细胞，并通过药物诱导细胞衰老。 2.总RNA提取和质量检测：采用TRIzol法提取总RNA，利用NanoDrop spectrophotometer检测RNA的纯度和浓度，利用Agilent 2100 Bioanalyzer检测RNA的完整性。 3.miRNA芯片鉴定：利用miRNA芯片技术鉴定细胞中与衰老相关的miRNA，采用RMA算法进行数据分析和归一化处理。 4.Real-time PCR确证：利用实时荧光定量PCR技术验证miRNA芯片鉴定的相关miRNA的表达情况，采用U6作为内控。 5.miRNA靶标鉴定：利用miRNA靶标预测软件和实验验证方法鉴定miRNA的靶标，并分析miRNA对靶标的调控机制。 预期成果： 通过以上方法，预计可以鉴定到与细胞衰老相关的miRNA，并从分子水平上揭示其调控机制，为老年病的防治提供新的治疗思路和方法。