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一种新的体外培养肝细胞模型 肝细胞的极性是肝脏独特功能的基础。体外肝细胞极性重建, 无论对研究肝组织的生理、病理、肝细胞移殖, 还是生物人工肝都有着重要意义。本文观察三明治构型培养条件下肝细胞功能极性的重建。 材料和方法 一、 动物 SD大鼠 (首医大动物室) 10只, 雌性, 体重200~250 g/只。 二、 u3000酸、glucagon、hgf、kgf-iq-roe的制备 Ⅰ型胶原, 培养板 (Costa公司) , 胶原酶, William′s E培养基, 考马斯亮蓝G-250, BIO-RAD 550型酶标检测仪。 William′s E培养液:Galacotose 2 g, William′s E 10.8 g, Glucagon 4 μg, EGF 5 μg, HGF 5 μg, Gentamycin50 mg, Penicillin 20万U, Dexamethasone (GIBCO公司) 0.4 mg, 加纯水至1 000 ml, 调pH值至7.45。以上试剂除注明外均来自Sigma公司。 P1:白蛋白寡核苷酸探针, P2:P450-b寡核苷酸探针 (华美生物制品公司) , 地高辛加尾试剂盒 (B.M.公司) , 变性鲑精DNA、DEPC (Promega公司) 。 三、 western-pcr检测细胞中蛋白及氨基酸物质水平 1.胶原凝胶的制备:Ⅰ型胶原80%