《基因工程及其应用》人教版高中生物必修PPT精品课件.pptx

第6章 第2节 授课时间：基因工程老师：BY YUSHEN基因工程及其应用导入新课设想能否让热带斑马鱼也发光?不能发光的热带斑马鱼能发光的水母一、　基因工程的原理基因工程：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的性状。原 理：基因重组。DNA分子水平。操作水平：操作环境：生物体外。定向地改造生物的性状，获得人类所需要的品种。结 果：二、基因工程的操作工具1、“基因剪刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)特点：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。实例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。(专一性)来源:主要是从原核生物中分离和纯化二、基因工程的操作工具G磷酸二酯键中轴线AG A A T T CAC T T A A G A A T T CG C T T A A G(黏性末端)(黏性末端)什么叫黏性末端？被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？不同的限制酶呢？G A A T T CG A A T T CC T T A A GC T T A A G用同种限制酶切割G A A T T CG A A T T CC T T A A GC T T A A GGC磷酸二酯键TATAATAT磷酸二酯键CG要想获得某个目的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？一个目的基因有几个黏性末端？练习使用EcoRI 剪切目的基因CTTCATGAATTCCGTAGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGCATCTTAAGGGATTCTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 黏性末端AATTCCGTAG 目的基因 GGCATCTTAA学以致用：CTAGA TTCTAGAAGATCTTAGATCXbaⅠTATG ACCAGTATCATATGGTATACNdeⅠ2、“基因针线”——DNA连接酶脱氧核糖和磷酸交替连接的DNA骨架的缺口磷酸二酯键G A A T T CC T T A A G2、“基因针线”——DNA连接酶GC磷酸二酯键TAATTATA磷酸二酯键CG2、“基因针线”——DNA连接酶磷酸二酯键使用DNA连接酶制作重组DNA分子AATTCCGTAG 甲片段GGCATCTTAACTTCATG AATTCCCTAA AATTCCGTAG 乙片段GGCATCTTAA GAAGTACTTAA GGGATT 3、基因的运输工具——运载体作为运载体必须具备哪些条件？①能够复制并稳定地保存。②具限制酶切点，以便与外源基因连接。③具有某些标记基因，便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒；最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。质粒细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代。现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的，常含抗生素抗性基因，是重组DNA技术中重要的工具。大肠杆菌的质粒：最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因（又称标记基因），如四环素抗性基因，携带这个基因的细菌对四环素具有抗药性。（标记基因）CTTAAG……G相同的限制酶CTTAA重组质粒DNA连接酶CTTAAGGCTTAA目的基因三、基因操作的基本步骤：供体细胞受体细胞目的基因1、提取目的基因2、目的基因与运载体结合3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的表达与鉴定三、基因操作的基本步骤：1、提取目的基因2、目的基因与运载体结合3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定小试身手C1.下列关于基因工程的叙述中,正确的是（ ）A.限制酶只用于提取目的基因B.细菌体内的环状DNA均可作运载体C.DNA连接酶可用于目的基因和运载体的连接D.重组DNA分子一旦进入受体细胞,基因工程则完成. 2.以下说法正确的是（ ）BA.目的基因是指重组DNA B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C.DNA重组所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体D.只要受体细胞中含有目的基因，目的基因就一定能够成功表达 四、基因工程的应用1、基因工程在农业上的应用四、基因工程的应用2