仪器分析课件第十八章 色谱法导论.pptVIP

第十八章 色谱法导论;概述;一、色谱法〔chromatography 〕;色谱法简史;二、色谱法的分类;2、按固定相的固定方式分类;3、按别离过程的机制分类;三、色谱法的特点和应用 ;色谱别离原理 ;分配系数和分配比1、分配系数K;2、分配比 k’;4、根本保存方程;色谱图及常用术语;一、基线;拐点间距离的一半，即图中1/2EF。 ; 如果进样量很小，浓度很低，在吸附等温线的线性范围内，色谱峰如果对称，可用Gauss正态分布函数表示：;拖尾峰： 当As大于1时，色谱峰的形状是前半局部信号增加快，后半局部信号减少慢。引起峰拖尾的主要原因是溶质在固定相中存在吸附作用，因此，拖尾峰也称为吸附峰。 伸舌峰： 当As小于1时，色谱峰是前半局部信号增加慢，后半局部信号减小快。因为伸舌峰主要是固定相不能给溶质提供足够数量适宜的作用位置，使一局部溶质超过了峰的中心，即产生了超载，所以也称超载峰。;色谱流出曲线的意义;四、保存值; 从进样开始到色谱峰最大值出现时所需要的时间，称为保存时间。;4、保存体积 从进样开始到色谱峰最大值出现时所通过的流动相的体积，其单位为mL。;〔二〕保存值与平衡常数K的关系;由此可推导：;小结：;色谱法根本理论;把色谱柱比作分馏塔，引用处理分馏过程的概念和理论来解释色谱的别离过程。; 根据上述假定，在色谱别离过程中，该组分的分布可计算如下： ; 流出曲线的形状和浓度极大的位置 按上述分配过程，对于n=5，k=1，m=1的体系，随着脉动进入柱中板体积载气的增加，组分分布在柱内任一板上的总量〔气液两相中的总质量〕见上表。 由塔板理论可建立流出曲线方程：;由流出曲线方程可推出：;有效理论塔板高度和有效理论塔板数;有效理论塔板数与容量因子的关系;小结：;塔板理论是一种半经验性的平衡理论;二、速率理论;〔1〕涡流扩散项－A;〔2〕分子扩散项—B;讨论： Dg 随柱温升高而增加，随柱压降低而减小； 流动相分子量大，Dg 小，即 B 小； u 增加，组份停留时间短，纵向扩散小； 对于液相色谱，因Dm 较小，B 项可忽略。;〔3〕传质阻力项— Cu;采用细颗粒、增大组分在流动相中的扩散系数Dm〔??用分子量小的流动相，使组分分子在流动相中的扩散系数增加〕、适当降低流动相线速度等均可使流动相传质阻力减小。;气相传质阻力：;将A、B、C值分别代入色谱板高方程式中：;van Deemter方程的H-u曲线;在某一流速〔最正确线速度〕下有一板高的极小值〔最小板高〕，相应的柱效最高。 LC的最小板高比GC的小一个数量级以上，〔理论上〕说明柱效LC比GC高得多，由于LC的最正确流速很小，假设使用，那么分析时间太长，故实际使用的流速比最正确流速高很多。;粒度越细，板高越小，受线速度影响亦小。在HPLC分析中采用细粒作固定相的理论根据！ 但颗粒细导致柱流速慢，当采用高压技术，才能实现HPLC的分析要求。;;〔5〕速率理论的要点; 2、影响色谱带展宽的其他因素;〔3〕 柱外效应 在色谱柱以外的降低柱别离效率的现象称为柱外效应。造成柱外效应的因素有两类：柱前后死体积和与进样有关的技术。 后者包括进样速度慢，进样量大及气化温度不够高等。对组分在两相中的分配系数不起任何作用，反而造成谱带展宽。因此，必须将柱外效应抑制到最低程度。;别离度;一、别离度的定义; 时，峰间距离等于 ，称为 别离。此时，峰有2%的相互重叠。 时，峰间距离等于 ，称为 别离，峰重叠小于1%，可以认为两峰已经完全分开。 假设 值更大，别离效果会更好，但会延长分析时间。;二、别离度公式;三、别离度的最正确化;〔二〕参数影响;2、别离度与 的关系; 由 图看出：当k＞10时，随容量因子增大，别离度的增长是微乎其微的。一般取k为1～10最宜。对于GC，通过提高温度，可选择适宜的k值，以改进别离度。而对于LC，只要改变流动相的组成，就能有效地控制k值。它对LC的别离能起到立竿见影的效果;3、别离度与 的关系;色谱柱温度在色谱别离中所起作用;样品量的影响;某商品色谱柱有关说明书内容为“SE-54〞 GC 柱，柱效2500，这种表示方法正确吗？为什么？; 例1：如果柱长L2为1m时，别离度为0.8，要实现完全别离(R＝1.5)，色谱柱Ll至少应有多长?;例2：用3m长的填充柱得到如下图的色谱流出曲线，为了得到R＝1.5的别离度，填充柱最短需要多少米?;例3：一色谱柱在某温度下的速率方程的A=0.08cm；B=0.65cm2/