不同保存方法对社鼠肌肉组织提取dna的影响.docxVIP

不同保存方法对社鼠肌肉组织提取dna的影响 20世纪50年代，waton和crick提出了dna双螺旋模型，并取得了前所未有的成果。随着聚合酶链反应（pcr）技术的成熟和完善，有限段长度多态法（rc）、随机生长多态dna（radt）、微卫星（ssr）和多态分布法（afil）等各种分子标记技术的开发已经变得越来越流行。这些分子标记技术在生态、保护生物学和遗传遗传培育、建立遗传模型、物种多样性和生物遗传多样性方面得到了广泛应用。 以PCR技术为核心的分子标记,无论采用哪种分子标记技术,都必须提取纯化结构完整的DNA.就目前应用较为广泛的DNA提取方法而言,高盐法提取DNA虽然简便、快速,但所提取的DNA纯度及稳定性较差,影响后期的聚合酶链反应;经典的酚-氯仿抽提法则由于消化时间长及抽提步骤繁琐,影响实验的进程.因此,有必要在动物组织DNA提取方法上进行改进. 笔者以小型哺乳动物社鼠(Niviventer confucianus)为例,参考文献的方法,对经典的酚-氯仿抽提方法进行了改进,通过调整酚与氯仿的比率\,减少抽提次数及消化时间,对采用-70 ℃超低温冰箱、-20 ℃低温冰箱、70%乙醇液浸泡、95%乙醇液浸泡和含50 mmol/L 乙二胺四乙酸二钠(EDTA)的70%乙醇液浸泡等不同方法保存的社鼠肌肉组织提取基因组DNA,将所提取的基因组DNA进行微卫星指纹图谱分析,探讨了改进